丙二醛(MDA)含量测定试剂盒(分光法)

产品简介：

丙二醛（MDA）是由于生物体官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生 过氧化反应而产生的。它的含量与生物体衰老及逆境伤害有密切关系。MDA在高温、酸性条件下，与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合，生成红色产物，在532nm有最大吸收峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量；同时测定600nm下的吸光度，利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。

保存条件: 

2-8℃避光保存，6个月有效。

产品组成：

产品使用：

建议正式实验前，选取 2个样本做预测定，了解实验样品情况，熟悉流程，避免样本和 试剂浪费。

一、样本准备：

1. 组织样本：

(a) 称取约0.1g组织（水分充足的样本可取0.5g），加入1ml提取液，进行冰浴匀浆；

(b) 12000rpm 4℃离心10min后取上清，置冰上待测。

【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积（ml）为1：5~10的比例进行提取。

2. 细胞/细菌样本：

(a) 先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；

(b) 取5×10⁶个细菌或细胞加入1ml提取液，在4ºC或冰浴进行匀浆(使用各类常见电动匀浆器或超声破碎)；

(c) 12000rpm，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

【注】：若增加样本量，按照每0.5~1×10⁷个细菌/细胞加入1ml提取液进行提取。

3. 液体样本：

澄清的液体样本直接测定，若浑浊则离心后取上清检测。

二、样品测定：

1. 分光光度计预热30min 以上，蒸馏水调零，同时水浴锅加热到90-95℃。

2. 在离心管中依次加入：

【注】 若是样本量极少的血清，可减少加样体积V1（如由400μl减至50μl，并用生理盐水或蒸馏水补齐400μl），则改变后的加样量V1需重新代入公式计算。

三、含量计算

1. 按样本鲜重计算：

MDA含量(nmol/g鲜重)=[ΔA÷(ε×d) ×V2×10⁹]÷(W×V1÷V)=16.1×ΔA÷W

2. 按细胞数量计算：

MDA含量(nmol/10⁴cell)= [ΔA÷(ε×d) ×V2×10⁹]÷(500×V1÷V)=0.032×ΔA

3. 按液体体积：

MDA含量(nmol/ml)=[ΔA÷(ε×d) ×V2×10⁹]÷V1=16.1×ΔA

V---样本提取液的总体积，1ml

V1---加入反应体系样本体积，0.4ml

V2---样本提取液与工作液总反应液体积，1×10^-3L

d---比色皿光径，1cm

W---样本取样质量，g

500---细胞数量，万

ε---MDA 摩尔消光系数，155×10³L/mol/cm

注意事项：

1.      工作液若有沉淀析出，50℃水浴至溶解。溶解后一个月内使用完毕可室温避光保存，长期保存则需4度避光保存（保存期间若有沉淀析出可再次50℃水浴至溶解待用）。

2.      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

3.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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