尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟比色法)
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 | 价格 |
NBS0105-100T | 尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟比色法) | 100T | 230 |
产品简介:
尿素(Urea)又称碳酰胺(carbamide),是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氮终产物,也是目前含氮量最高的氮肥;尿素检测方法大致分为化学方法和酶学方法,后者被认为是间接方法,先经尿素酶分解尿素为铵离子,然后根据波氏反应,检测铵离子的生成量。
尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟比色法)检测原理是在酸性条件下加热一定时间,尿素与二乙酰缩合,生成红色二嗪(diazine),该反应被称为Fearon反应,颜色深浅与尿素含量呈正比,通过分光光度比色法(酶标仪)测定540nm处吸光度,该试剂盒可用于检测人体、动物的血浆、血清、尿液等样品中尿素(旧称尿素氮,BUN)含量,尿液样品可直接检测,无需处理。
保存条件:
2-8℃避光保存,6个月有效。
产品组成:
组分 | 名称 | 规格 | Storage |
NBS0105-A | 尿素标准(100mmol/L) | 1ml | 4℃ |
NBS0105-B | 尿素标准稀释液 | 1ml | RT |
NBS0105-C | Diazine显色液 | 25ml | 4℃避光 |
NBS0105-D | Urea Assay Buffer | 250ml | 4℃避光 |
自备材料:
离心管或小试管、水浴锅或恒温箱、比色杯、分光光度计
产品使用:(仅供参考)
1、准备样品:
血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于该试剂盒的测定,-20℃冻存。尿液中尿素含量较高,应先用蒸馏水作1:50稀释后再测。
2、配制标准品工作液:
取适量的尿素标准(100mmol/L),按尿素标准(100mmol/L):尿素标准稀释液=1:19的比例混合,使浓度达到5mmol/L,即为标准品工作液-尿素标准(5mmol/L);4℃保存,1周有效。
3、Urea 加样:
按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的Urea 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
尿素标准稀释液 | 0.01 | — | — |
尿素标准(5mmol/L) | — | 0.01 | — |
待测样品 | — | — | 0.01 |
Diazine显色液 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
Urea Assay Buffer | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
4、Urea 检测:
充分混匀,沸水水浴12min,置于冷水中冷却5 min,,分光光度计检测540nm处吸光度,比色杯光径1cm,空白管调零,读取标准孔、测定孔的吸光度,分别为A标准、A测定。
5、计算:
血清尿素(mmol/L)=(A测定/A标准)×5 mmol/L
式中:A测定=测定管的吸光度
A标准=标准管的吸光度
血清尿素氮(mg/L)=尿素(mmol/L)×28
参考区间:
成年人血清尿素:2.9~8.2mmol/L
注意事项:
1. 二乙酰一肟比色法线性范围为14mmol/L,如果浓度较高,需用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2. 一般显色后应立即检测,否则会有轻度褪色。
3. 尿液样品中一般尿素含量较高,样品需用1:50稀释,如果显色后吸光度仍超过本法的线性范围,还需将稀释尿液,再行稀释重新检测。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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