与其它基于BAPTA结构的指示剂相比,Rhod-5N显示出更低的钙离子亲和力(Kd=~320 µM),适用于浓度在10µM~1mM的钙离子测定。与母本Rhod-2指示剂类似,Rhod-5N在不含二价阳离子的情况下基本无荧光,一旦与钙离子结合后,呈现出显著的荧光增加,光谱基本无迁移。低亲和钙离子指示剂特别适合于具高浓度钙离子的细胞区室研究,比如:内质网,在这种区室内高亲和探针对腔室钙水平变化不敏感。
Rhod-5N AM是Rhod-5N的一种乙酰甲酯衍生物,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。一旦进入细胞内,即被其内酯酶剪切生成不具膜渗透性的Rhod-5N,从而滞留在胞内以发挥相应生理功能。本品以冻干粉的形式提供,使用时只需经无水DMSO充分溶解,配置成2~5mM的储存液,并依据具体实验和相关文献资料调整到需要的工作浓度即可。