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  • Fura-2是一种常用的紫外光激发和比率测定型Ca2+荧光探针。一旦与Ca2+结合后,Fura-2的最大激发波长发生蓝色迁移,由原来的363nm(Ca2+-free)迁移到335nm(Ca2+-saturated),而最大发射波长基本未变化,保持在510nm左右。通常情况,分别用最大激发波长340nm和380nm来激发Fura-2,且用340/380nm激发下的荧光比值来检测细胞内Ca2+浓度。使用比值检测,可消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,探针的渗漏,细胞厚度差异等因素导致的检测误差。Fura-2自1985年合成以来,广泛用于各种细胞系统和生化用途,特别是数字显微成像。单波长检测,Fura-2与Ca2+结合后,推荐用最大激发和发射波长分别为340nm和510nm;双波长检测,则推荐用最大激发和发射波长分别为340/510nm和380/510nm; Fura-2 Pentapotassium Salt是五钾盐形式的Fura-2,不具有细胞膜渗透性,溶于水。可通过微注射、膜片电极、划痕标记等方式加载进入细胞,从而检测胞内钙离子水平。
  • Fura-FF是钙离子指示剂Fura-2(货号:NBS7642,货号:NBS7663)的二氟化衍生物。与Fura-2不同,Fura-FF对镁离子(Mg2+)基本不敏感,减少了该离子带来的测定干扰。Fura-FF比Fura-2,呈现出更高的钙离子解离常数(Kd=6μM versus 0.14μM)。然而,两者的光谱特征类似,体系不含钙离子时激发和发射波长是365/514nm,当体系含高浓度钙离子时激发和发射波长迁移到339/507nm。低亲和钙离子染料,包括:Fura-FF,更倾向于研究含高浓度钙离子的细胞器(比如:线粒体),或具相对较低钙离子缓冲能力的细胞系统,比如:神经元树突和神经树突棘。 Fura-FF AM是Fura-FF的一种乙酰甲酯衍生物,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。一旦进入细胞内,即被其内酯酶剪切生成不具膜渗透性的Fura-FF,从而滞留在胞内以发挥相应生理功能。
  • Fura Red是一种可见光激发的Fura-2类似物,提供独特的可能性使其与单波长激发、绿色荧光的钙离子探针(比如:Fluo-8)联合使用时,通过显微光度术、成像或流式细胞术来比率法测定单细胞内的Ca2+水平。Fura Red, AM是Fura Red的一种乙酰甲酯衍生物,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。一旦进入细胞内,即被其内酯酶剪切生成不具膜渗透性的Fura Red,从而滞留在胞内以发挥相应生理功能。Fura Red, AM能够与Fluo-3 AM、Fluo-4 AM、Fluo-8 AM等同时加载进入细胞。两种钙离子探针结合使用的优势在于能用更长的激发波长。这比传统的紫外或近紫外激发的比率型探针对细胞造成更小的伤害,由于可见光波长对细胞的光毒性更小。Fura Red显著的斯托克斯位移使其能与荧光素或荧光素样的染料(使用单一激发波长)进行多色荧光检测。比如,研究者想同时测定单核细胞和粒细胞的钙流和氧化爆发,通过同时分析Fura Red和罗丹名123(二氢罗丹名123的氧化产物)的荧光值来满足目的。Fura Red也能与转染细胞内的蓝色荧光蛋白结合使用。
  • 与其它基于BAPTA结构的指示剂相比,Rhod-5N显示出更低的钙离子亲和力(Kd=~320 µM),适用于浓度在10µM~1mM的钙离子测定。与母本Rhod-2指示剂类似,Rhod-5N在不含二价阳离子的情况下基本无荧光,一旦与钙离子结合后,呈现出显著的荧光增加,光谱基本无迁移。低亲和钙离子指示剂特别适合于具高浓度钙离子的细胞区室研究,比如:内质网,在这种区室内高亲和探针对腔室钙水平变化不敏感。 Rhod-5N AM是Rhod-5N的一种乙酰甲酯衍生物,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。一旦进入细胞内,即被其内酯酶剪切生成不具膜渗透性的Rhod-5N,从而滞留在胞内以发挥相应生理功能。本品以冻干粉的形式提供,使用时只需经无水DMSO充分溶解,配置成2~5mM的储存液,并依据具体实验和相关文献资料调整到需要的工作浓度即可。
  • Fluo-5N是Fluo-4的结构类似物,具更低的钙结合亲和力,使其非常适用于钙水平在1µM~1mM区间内的胞内钙离子检测,而Fluo-3和Fluo-4在这个区间内的钙离子反应达到饱和。Fluo-5N与氩离子激光器的488nm激发光兼容,使其适用于共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等仪器。激发和发射波长分别是494和516nm。一旦与钙离子结合,荧光强度增加大于100倍,波长迁移非常少。 Fluo-5NAM是Fluo-5N的一种乙酰甲酯衍生物,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。
  • 与其它基于BAPTA结构的指示剂相比,Rhod-5N显示出更低的钙离子亲和力(Kd=~320 µM),适用于浓度在10µM~1mM的钙离子测定。与母本Rhod-2指示剂类似,Rhod-5N在不含二价阳离子的情况下基本无荧光,一旦与钙离子结合后,呈现出显著的荧光增加,光谱基本无迁移。低亲和钙离子指示剂特别适合于具高浓度钙离子的细胞区室研究,比如:内质网,在这种区室内高亲和探针对腔室钙水平变化不敏感。 Rhod-5N Tripotassium Salt是三钾盐形式的Rhod-5N,不具有细胞膜渗透性,溶于水。可通过微注射、膜片电极、划痕标记等方式加载进入细胞,从而检测胞内钙离子水平。
  • Fluo-5N是Fluo-4的结构类似物,具更低的钙结合亲和力,使其非常适用于钙水平在1µM~1mM区间内的胞内钙离子检测,而Fluo-3和Fluo-4在这个区间内的钙离子反应达到饱和。Fluo-5N与氩离子激光器的488nm激发光兼容,使其适用于共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等仪器。激发和发射波长分别是494和516nm。一旦与钙离子结合,荧光强度增加大于100倍,波长迁移非常少。 Fluo-5N Pentapotassium Salt是五钾盐形式的Fluo-5N,不具细胞膜渗透性,溶于水。可通过微注射、膜片电极、划痕标记等方式加载进入细胞,从而检测胞内钙离子水平。
  • Fluo-8,是目前最亮的可见光激发波长Ca2+荧光探针,其荧光强度比Fluo-4强两倍,比Fluo-3强四倍。Fluo-8具中等程度的Ca2+亲和力,几乎接近Fluo-3,Fluo-4(Fluo-3: Kd=0.4μM、Fluo-4: Kd=0.36μM、Fluo-4: Kd= 0.389μM),使用上几乎同Fluo-3和Fluo-4。Fluo-8不仅维持Fluo-3,Fluo-4便捷的光谱检测特性,与Ca2+结合后的最大激发波长为490nm,最大发射波长为514nm。而且具有改善的细胞载入和Ca2+响应能力。Fluo-8加载具较弱的温度依赖性,在室温或37℃孵育皆染色良好,不像Fluo-3,Fluo-4严格要求在37℃孵育,此特征使其更适用于HTS高通量筛选实验。Fluo-8应用广泛,与许多细胞系和靶向样本兼容,不会受配体或靶标本身信号干扰。Fluo-8可通过激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光显微镜等来检测胞内钙离子水平的变化。 Fluo-8 Sodium Salt是钠盐形式的Fluo-8,不具有细胞膜渗透性,溶于水。可通过微注射、膜片电极、划痕标记等方式加载进入细胞,从而检测胞内钙离子水平。
  • Fluo-8,是目前最亮的可见光激发波长Ca2+荧光探针,其荧光强度比Fluo-4强两倍,比Fluo-3强四倍。Fluo-8具中等程度的Ca2+亲和力,几乎接近Fluo-3,Fluo-4(Fluo-3: Kd=0.4μM、Fluo-4: Kd=0.36μM、Fluo-4: Kd= 0.389μM),使用上几乎同Fluo-3和Fluo-4。Fluo-8不仅维持Fluo-3,Fluo-4便捷的光谱检测特性,与Ca2+结合后的最大激发波长为490nm,最大发射波长为514nm。而且具有改善的细胞载入和Ca2+响应能力。Fluo-8加载具较弱的温度依赖性,在室温或37℃孵育皆染色良好,不像Fluo-3,Fluo-4严格要求在37℃孵育,此特征使其更适用于HTS高通量筛选实验。Fluo-8应用广泛,与许多细胞系和靶向样本兼容,不会受配体或靶标本身信号干扰。Fluo-8可通过激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光显微镜等来检测胞内钙离子水平的变化。 Fluo-8 Potassium Salt是钾盐形式的Fluo-8,不具有细胞膜渗透性,溶于水。可通过微注射、膜片电极、划痕标记等方式加载进入细胞,从而检测胞内钙离子水平。
  • Fluo-4是可见光激发波长Ca2+荧光探针Fluo-3的改良版本,通过将Fluo-3结构上的氯离子(Cl-)替换为电子吸引力更强的氟离子(F-),使得最大激发波长往短波长偏移10nm左右。正由于这个波长更接近氩激光器的波长,则当使用氩激光器来激发探针Fluo-4,能够得到更强的荧光强度,比Fluo-3强一倍。另外,Fluo-4的Ca2+亲和力几乎接近Fluo-3(Fluo-3: Kd=0.4μM、Fluo-4: Kd=0.36μM),因此,使用上几乎同Fluo-3。Ca2+结合后的最大激发波长为494nm,最大发射波长为516nm。可通过激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等来检测胞内钙离子水平的变化。 Fluo-4 Pentapotassium Salt是五钾盐形式的Fluo-4,不具有细胞膜渗透性,溶于水。可通过微注射、膜片电极、划痕标记等方式加载进入细胞,从而检测胞内钙离子水平。