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  • 钙(Calcium)是一种重要的且普遍存在的第二信使,参与调控各种各样的细胞过程,包括细胞增殖,基因转录,肌肉收缩和胞吞作用。响应于大量的刺激物,钙离子(Ca2+)从胞内的储存池释放出来;而胞内Ca2+浓度的增加会引起细胞功能的活化、调节和终止。许多泵和离子通道都允许这种独特的阳离子进入和离开细胞,并且在细胞质和胞内蓄池间移动。 钙离子载体4-溴- A23187(4-bromo-A23187,CAS NO:76455-82-8),高度选择性的Ca2+载体,能够提高胞内Ca2+水平。通常用做荧光探针确定胞内Ca2+水平的校准标准品(calibration standard),用来平衡胞内外的Ca2+水平,以及运载Mn2+进入细胞以淬灭胞内探针的荧光。作为抗生素A23187的卤化衍生物,基本没有内源荧光,可与UV激发的Ca2+指示剂如Fura-2,Indo-1,Quin-2,以及可见光激发的指示剂如Fluo-4,Fluo-3,Rhod-2联合使用。还能用来平衡胞内外Mg2+浓度,适合校准Mg2+指示剂。
  • 钙(Calcium)是一种重要的且普遍存在的第二信使,参与调控各种各样的细胞过程,包括细胞增殖,基因转录,肌肉收缩和胞吞作用。响应于大量的刺激物,钙离子(Ca2+)从胞内的储存池释放出来;而胞内Ca2+浓度的增加会引起细胞功能的活化、调节和终止。许多泵和离子通道都允许这种独特的阳离子进入和离开细胞,并且在细胞质和胞内蓄池间移动。
  • MitoSOX红色线粒体超氧化物荧光探针(MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator)是二氢乙啶(dihydroethidum,DHE)的一种阳离子衍生物,特别设计高度特异性检测活细胞线粒体超氧化物。 MitoSOX Red是一种特异性靶向活细胞线粒体的新型荧光探针,具细胞膜渗透性,且能快速和选择性结合线粒体。一旦进入线粒体,被超氧化物氧化,与核酸结合后产生很强的红色荧光。MitoSOX Red能够立即被超氧化物,并不是其他ROS-或RNS(活性氮)生成系统氧化。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)能够预防MitoSOX Red被氧化。 MitoSOX Red可用于在对活细胞线粒体释放的超氧化物的直接检测中区别纯化线粒体的人为误差。另外,MitoSOX Red是一种有价值的工具,用来筛选多种疾病中调节氧化应激的药物。
  • FCCP,即Carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone,CAS NO. 370-86-5,一种质子载体(H+ ionophore),也是一种强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使质膜和线粒体膜去极化。FCCP可影响细胞钙离子参与的各种活动,还能抑制K+背景电流和诱导小量内向电流,降低0.1单位pH,以及诱导胞内Na+提高。FCCP能刺激Mg2+-ATPase活性,抑制β-淀粉样生成,以及模拟谷氨酸受体激动剂NMDA对线粒体超氧化物产生的生理效应。
  • CCCP,即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,CAS NO. 555-60-2,一种质子载体(H+ionophore),是一种强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。CCCP影响细胞钙离子参与的各种活动。还能抑制肝脂酶分泌,以及部分抑制刷状缘膜囊内的pH梯度活化的Cl-摄取和Cl-/Cl-交换。CCCP还能抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
  • 带正电荷的罗丹明染料(比如罗丹明酯)选择性定位在线粒体,因此,普遍用来标记活细胞线粒体。除了选择性标记线粒体外,与JC-1一样,四甲基罗丹明甲酯(Tetramethylrhodamine Methyl Ester,TMRM)广泛用来测定线粒体膜电位。TMRM具细胞膜渗透性,聚集在活线粒体(完整膜电位)上。如果细胞健康且线粒体发挥功能,发出明亮的荧光信号。一旦线粒体膜电位丧失,TMRM不再累积,荧光信号减弱或消失。TMRM信号可用荧光显微镜、流式细胞仪、细胞分选、高通量筛选和高内涵细胞成像分析进行检测。
  • 带正电荷的罗丹明染料(比如罗丹明酯)选择性定位在线粒体,因此,普遍用来标记活细胞线粒体。除了选择性标记线粒体外,与JC-1一样,四甲基罗丹明乙酯(Tetramethylrhodamine Ethyl Ester,TMRE)广泛用来测定线粒体膜电位。TMRE在细胞膜不会形成聚集物,与膜蛋白的相互作用非常小。因此,该染料的跨膜分布与膜电位直接相关。TMRE的光谱特性类似于TRITC,使用起来相当方便。
  • ANEP (AminoNaphthylEthenylPyridinium)染料由Leslie Loew和同事开发,是最灵敏且稳定的快速响应探针,能检测亚毫秒级的膜电位变化。Di-4-ANEPPS(货号:NBS3227)和Di-8-ANEPPS(货号:NBS3228)在各种组织、细胞和模型膜系统中表现出相当一致的荧光强度变化率(10%荧光变化/100mV)。ANEP染料的电子结构发生变化,从而,它们的荧光光谱对周围的电场变化做出响应。这些光学响应足够快来检测兴奋细胞(包括单个神经元、心肌细胞和完整组织制备物)的瞬时电位变化。另外,ANEP染料的激发光谱呈现出电位依赖的迁移,从而使其能通过测定激发波长下的荧光比来定量膜电位。ANEP染料结构上的差异使其适用于各种特定应用。
  • ANEP (AminoNaphthylEthenylPyridinium)染料由Leslie Loew和同事开发,是最灵敏且稳定的快速响应探针,能检测亚毫秒级的膜电位变化。Di-4-ANEPPS(货号:NBS3227)和Di-8-ANEPPS(货号:NBS3228)在各种组织、细胞和模型膜系统中表现出相当一致的荧光强度变化率(10%荧光变化/100mV)。ANEP染料的电子结构发生变化,从而,它们的荧光光谱对周围的电场变化做出响应。这些光学响应足够快来检测兴奋细胞(包括单个神经元、心肌细胞和完整组织制备物)的瞬时电位变化。另外,ANEP染料的激发光谱呈现出电位依赖的迁移,从而使其能通过测定激发波长下的荧光比来定量膜电位。ANEP染料结构上的差异使其适用于各种特定应用。
  • ANEP (AminoNaphthylEthenylPyridinium)染料由Leslie Loew和同事开发,是最灵敏且稳定的快速响应探针,能检测亚毫秒级的膜电位变化。Di-4-ANEPPS(货号:NBS3227)和Di-8-ANEPPS(货号:NBS3228)在各种组织、细胞和模型膜系统中表现出相当一致的荧光强度变化率(10%荧光变化/100mV)。ANEP染料的电子结构发生变化,从而,它们的荧光光谱对周围的电场变化做出响应。这些光学响应足够快来检测兴奋细胞(包括单个神经元、心肌细胞和完整组织制备物)的瞬时电位变化。另外,ANEP染料的激发光谱呈现出电位依赖的迁移,从而使其能通过测定激发波长下的荧光比来定量膜电位。ANEP染料结构上的差异使其适用于各种特定应用。