Fura-2是一种常用的紫外光激发和比率测定型Ca2+荧光探针。一旦与Ca2+结合后,Fura-2的最大激发波长发生蓝色迁移,由原来的363nm(Ca2+-free)迁移到335nm(Ca2+-saturated),而最大发射波长基本未变化,保持在510nm左右。通常情况,分别用最大激发波长340nm和380nm来激发Fura-2,且用340/380nm激发下的荧光比值来检测细胞内Ca2+浓度。使用比值检测,可消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,探针的渗漏,细胞厚度差异等因素导致的检测误差。Fura-2自1985年合成以来,广泛用于各种细胞系统和生化用途,特别是数字显微成像。单波长检测,Fura-2与Ca2+结合后,推荐用最大激发和发射波长分别为340nm和510nm;双波长检测,则推荐用最大激发和发射波长分别为340nm和380nm;
Fura-2, AM是Fura-2的一种乙酰甲酯衍生物,具有细胞膜渗透性,只需简单培养,即可轻易进入细胞。一旦进入细胞内,即被其内酯酶剪切生成不具膜渗透性的Fura-2,从而滞留在胞内以发挥相应生理功能。本品以冻干粉的形式提供,使用时只需经无水DMSO充分溶解,配置成1~5mM的储存液,并稀释到合适的工作浓度即可。进行细胞内Ca2+检测,Fura-2, AM的常用浓度为0.5~5μM。