二氢罗丹明123

Dihydrorhodamine 123 (DHR 123)
 

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产品简介：

二氢罗丹明123（Dihydrorhodamine 123，DHR 123，CAS：109244-58-8）是一种不带电荷且无荧光的活性氧（ROS）指示剂，可被动扩散穿过细胞膜。进入细胞后，DHR 123 被氧化为带正电荷的罗丹明123（货号NBS3208），因线粒体膜电位驱动而在线粒体中积累，发射亮绿色荧光（Ex/Em = 500/536 nm）。

单一的一氧化氮（NO）、超氧化物（O₂•⁻）或过氧化氢（H₂O₂）均不能单独氧化 DHR 123；但在细胞色素c、Fe²⁺ 等过渡金属离子或过氧化物酶的协同作用下，DHR 123 可被氧化生成荧光产物罗丹明123。DHR 123 可用于检测内皮细胞、嗜酸性粒细胞及反应性小胶质细胞产生的活性氧中间体。

化学信息：

1)     CAS NO.：109244-58-8

2)     化学名：2-(3,6-Diamino-9H-xanthene-9-yl)-benzoic acid methyl ester

3)     同义名：DHR 123

4)     分子式：C₂₁H₁₈N₂O₃

5)     分子量：346.4

6)     纯度：≥98%（HPLC）

7)     外观：粉红色粉末

8)     溶解性：溶于乙醇（~10 mg/ml），DMSO（~10 mg/ml），DMF（~10 mg/ml），微溶于水

9)     化学结构图：

保存条件: 

-20℃保存（两年有效）

产品使用（需根据具体应用场景及检测灵敏度进行优化调整）：

1.     溶液配制

1)     母液配制：本品以无水 DMSO 为溶剂配制成 10 mM 溶液，需按单次用量分装，避光置于 - 20℃或 - 80℃保存，避免反复冻融。

2)     工作液配制：用无血清细胞培养基将原液稀释至工作浓度。常用工作浓度为 1–10 μM（推荐 5 μM，需根据实验体系优化）。工作液建议现配现用，配制及使用过程中注意避光。

2.     细胞染色与检测

1)     细胞预处理：根据实验设计，用活性氧诱导剂或抑制剂处理细胞。若使用外源性氧化剂，染色前需用生理缓冲液或培养基冲洗细胞 2–3 次，以去除残留化合物，避免染料被非特异性氧化。

2)     染料加载：去除细胞原有培养基，加入含 DHR 123（终浓度 5 μM）的无血清培养基。

3)     孵育：37℃ 避光孵育 30 min。

4)     检测：通过荧光显微镜或流式细胞术检测。可直接检测，无需清洗；若显微观察背景较高，可用预热的生理缓冲液轻洗一次以降低背景。

注意事项：

1.     储存液（如以 DMSO 配制）建议分装为单次用量，-20℃ 避光冻存，切勿反复冻融。

2.     为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！

活性氧探针（HPF, APF, DCFH）对各种活性氧物质的反应特异性：

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