<NW3212> 外泌体提取纯化试剂盒(体液)

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<NW3212> 外泌体提取纯化试剂盒(体液)

外泌体提取纯化试剂盒(体液)
货号: NW3212
规格: 30T
品牌:NoninBio
促销: 4875.00
价格: 4875.00
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NW3212
30 T

 

外泌体提取纯化试剂盒(体液)

 

产品编号

产品名称

包装规格

NW3212-30T

外泌体提取纯化试剂盒 (体液)

30T

【温馨提示】:见我司整理的专注外泌体研究,外泌体提取专家,专注外泌体提取试剂盒产品专题。


产品简介:

外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能,在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子;然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。

外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒,而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。由本公司自主开发的外泌体快速提取试剂盒,组分经过优化处理,适用于脑脊液、羊水、乳汁、唾液、肺泡灌洗液以及鼻腔盥洗液等体液中的外泌体提取,并搭配纯化过滤装置,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒,可用于电镜分析、NTA粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。

 

保存条件

4℃保存(一年有效)

 

保存条件

室温保存,2年有效。

 

产品组成:

名称

规格

Exosome Concentration Solution*

18 mL

Exosome Purification Filter*

30 Tubes

* Nuclease-free, Sterile


自备材料:

高速离心机,1×PBS缓冲液(无菌)。

 

产品使用:

一、样品预处理

1.      取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于25℃水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;

2.      样品初始用量:(单次提取时的样品量)

样品名称

最低量

肺泡灌洗液

1.0 mL

腹 水

1.0 mL

3.      离心去细胞碎片:将样品转移至离心管中,于4℃3000 g离心10 min,去除样品中的细胞碎片;

4.      上清液转移:去除细胞碎片的离心上清液转移到新的离心管中;

5.      离心去杂质:转移后的上清液于4℃10000 g离心10 min,去除样品中杂质,将离心

后的上清液转移至新的离心管中。(注:若沉淀较多,可10000g/10min离心多次至无明显沉淀,每次取离心上清液)

 

二、提取外泌体

1.      上清液预处理:在去除杂质的离心上清液中加入Exosome Concentration Solution(ECS

试剂),具体的加入剂量如下(注:其他剂量规格请根据表中的试剂用量等比例换算)

样品名称

样品剂量

ECS剂量

肺泡灌洗液

2.0 mL

0.5 mL

腹 水

2.0 mL

0.5 mL

2.      溶液混合:加入ECS试剂后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再放置于4℃静置2 h

3.      沉淀外泌体:取出装有混合液的离心管于4℃10000 g离心60 min,弃上清,沉淀中富含外泌体颗粒;(注:尽可能吸净上清液)

4.      外泌体重悬:取1×PBS均匀吹打离心沉淀物(具体加入剂量如下表),待其溶解后,将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中;

样品体积

加入PBS剂量

2.0 mL

0.2 mL

(注:其他剂量请根据表中的试剂用量等比例换算)

5.      收获外泌体颗粒:将含有重悬液的1.5mL离心管于4℃12000 g离心2 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒。(注:若沉淀较多,可12000 g /2min离心多次至无明显沉淀,每次取离心上清液)

 

三、纯化外泌体

1.      纯化外泌体:将收获的外泌体颗粒粗品转入Exosome Purification FilterEPF)上室中,于4℃3000 g离心10 min,离心后收集EPF柱管底的液体,此液体即为纯化后的外泌体颗粒;(注:EPF柱不可重复使用)

2.      外泌体的保存:纯化后的外泌体以50-100μL进行分装保存于-80℃低温冰箱中,以备后续实验使用。

 

注意事项:

1.      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!

 

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