外泌体提取纯化试剂盒(体液)
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
NW3212-30T | 外泌体提取纯化试剂盒 (体液) | 30T |
【温馨提示】:见我司整理的专注外泌体研究,外泌体提取专家,专注外泌体提取试剂盒产品专题。
产品简介:
外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能,在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子;然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。
外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒,而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。由本公司自主开发的外泌体快速提取试剂盒,组分经过优化处理,适用于脑脊液、羊水、乳汁、唾液、肺泡灌洗液以及鼻腔盥洗液等体液中的外泌体提取,并搭配纯化过滤装置,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒,可用于电镜分析、NTA粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。
保存条件:
4℃保存(一年有效)
保存条件:
室温保存,2年有效。
产品组成:
名称 | 规格 |
Exosome Concentration Solution* | 18 mL |
Exosome Purification Filter* | 30 Tubes |
* Nuclease-free, Sterile
自备材料:
高速离心机,1×PBS缓冲液(无菌)。
产品使用:
一、样品预处理
1. 取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于25℃水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;
2. 样品初始用量:(单次提取时的样品量)
样品名称 | 最低量 |
肺泡灌洗液 | 1.0 mL |
腹 水 | 1.0 mL |
3. 离心去细胞碎片:将样品转移至离心管中,于4℃以3000 g离心10 min,去除样品中的细胞碎片;
4. 上清液转移:去除细胞碎片的离心上清液转移到新的离心管中;
5. 离心去杂质:转移后的上清液于4℃以10000 g离心10 min,去除样品中杂质,将离心
后的上清液转移至新的离心管中。(注:若沉淀较多,可10000g/10min离心多次至无明显沉淀,每次取离心上清液)
二、提取外泌体
1. 上清液预处理:在去除杂质的离心上清液中加入Exosome Concentration Solution(ECS
试剂),具体的加入剂量如下(注:其他剂量规格请根据表中的试剂用量等比例换算)
样品名称 | 样品剂量 | ECS剂量 |
肺泡灌洗液 | 2.0 mL | 0.5 mL |
腹 水 | 2.0 mL | 0.5 mL |
2. 溶液混合:加入ECS试剂后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再放置于4℃静置2 h;
3. 沉淀外泌体:取出装有混合液的离心管于4℃以10000 g离心60 min,弃上清,沉淀中富含外泌体颗粒;(注:尽可能吸净上清液)
4. 外泌体重悬:取1×PBS均匀吹打离心沉淀物(具体加入剂量如下表),待其溶解后,将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中;
样品体积 | 加入PBS剂量 |
2.0 mL | 0.2 mL |
(注:其他剂量请根据表中的试剂用量等比例换算)
5. 收获外泌体颗粒:将含有重悬液的1.5mL离心管于4℃以12000 g离心2 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒。(注:若沉淀较多,可12000 g /2min离心多次至无明显沉淀,每次取离心上清液)
三、纯化外泌体
1. 纯化外泌体:将收获的外泌体颗粒粗品转入Exosome Purification Filter(EPF柱)上室中,于4℃以3000 g离心10 min,离心后收集EPF柱管底的液体,此液体即为纯化后的外泌体颗粒;(注:EPF柱不可重复使用)
2. 外泌体的保存:纯化后的外泌体以50-100μL进行分装保存于-80℃低温冰箱中,以备后续实验使用。
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!
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产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
120ml | ||
20T | ||
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30T | ||
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20T | ||
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20T |