DNA抽提试剂（25:24:1替代试剂），pH＞7.8

产品简介：

DNA抽提试剂(25:24:1替代试剂,pH＞7.8)，由Tris饱和酚、氯仿替代物和异戊醇组成，可用于样品中基因组的DNA抽提/DNA提取。该抽提液pH高于7.8，可以保证分相后DNA存在于上层水相中。

其提取DNA的原理是样品通过DNA裂解缓冲液裂解后释放出DNA，再通过DNA抽提溶液(25:24:1)抽提，去除样品中蛋白、多糖、酚类等杂质，再加入乙醇或异丙醇等沉淀核酸即可使DNA分离出来。该抽提溶液可以使蛋白质变性，同时利用RNA、DNA、蛋白质三者的性质差别来分离DNA。抽提离心后的上层为含DNA的水相，中间为变性蛋白相，下层为有机溶剂相。

保存条件: 

2-8℃避光保存，1年有效。

自备材料：

1.      新鲜植物材料、CTAB提取液（货号：NBS0047）、核酸抽提试剂(24:1)（货号：NBS0051）、乙醇或异丙醇、TE缓冲液

2.      移液器、水浴锅、1.5ml 离心管、离心机、制冰机、低温冰箱

产品使用：(仅供参考)

1.    植物基因组DNA提取：取0.2-0.5克新鲜植物材料，于液氮中研磨成粉末；将粉末转入1.5ml离心管中，立即加入0.7 ml 65℃预热的2×CTAB提取液(含β-巯基乙醇)，65℃水浴30分钟，间歇混匀。(CTAB抽提液在低于15℃时会形成沉淀析出，因此，在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热，且离心时温度不要低于15℃ )

2.    溶液中加入等体积的 DNA 抽提溶液，轻缓颠倒混匀8-10次，常温12000 rpm离心10分钟，样品分为三层：上层水相中包含DNA。为得到更高纯度的DNA，可以重复一次。

3.    将上层水相转入新的1.5ml离心管，加入等体积的核酸抽提试剂(24:1)(货号：NBS0051)，轻柔混匀，常温12000 rpm离心10分钟。

4.    将上层水相转入新的1.5ml 离心管中，加入0.6倍体积的冰冷异丙醇，轻柔混匀，冰浴30分钟。12000 rpm 4℃离心10分钟。

5.    去上清液，加入1ml 70%乙醇漂洗沉淀，4℃ 12000 rpm离心3分钟，吸弃乙醇。

6.    4℃ 12000 rpm离心1分钟，用移液器吸尽残余乙醇，超净台吹干沉淀。(沉淀不能彻底干燥，否则不好溶解)

7.    加入50-100μl的超纯水或TE缓冲液溶解DNA，-20℃保存备用。

注意事项：

1.      溶液长期静置后会有分相，下层为有机酚相。使用前摇匀并静置分相后取下层使用。

2.      本试剂有较强的腐蚀性，应尽量避免皮肤接触或吸入体内。

3.      每次转移水相应使用新枪头，防止有机相混入，造成交叉污染。

4.      本品含酚和氯仿类似物，具有挥发性，且有一定毒性，操作时需佩戴手套并在通风环境下进行，使用完毕后应及时密封保存。

5.      抽提后的水相需通过乙醇或异丙醇沉淀核酸，并用70%乙醇洗涤去除盐分。

6.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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