Exonuclease III 核酸外切酶 III

产品简介：

Exonuclease III是一种核酸外切酶，该酶作用于双链DNA，从3'-OH末端方向逐步切去单核苷酸。
　　该酶最适底物是平末端或5'末端突出的DNA，但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性，因此该酶难以切割3'突出末端。3'到5'外切酶活性对底物的消化程度随3'突出末端的长度而变化，四碱基或更长的突出末端难以被切割。这种特性可以用于生产特定方向的单链DNA，将线性化DNA设计成为一端为不切割末端（3'突出端），另一端则设计为易切割末端（平端或5'突出端），此时Exonuclease III将仅消化一条链。
　　Exonuclease III也有RNase H、3'-磷酸酶和脱嘌呤/嘧啶-核酸内切酶活性。

产品组成：

保存条件: 

-20℃保存，2年有效。

产品应用：

1. 单向嵌套缺失

2. 定点突变

3. 单链特异性探针的制备

4. 双脱氧测序用单链底物的制备

反应条件：

1× Exo III Buffer，37℃孵育。

酶活定义：

一个酶活单位(U)的定义是以双链DNA为底物在37℃下孵育30 min，生成1 nmol的酸可溶性物所需的酶量。

核酸内切酶污染：

Exonuclease III 与超螺旋DNA共同孵育后进行琼脂糖凝胶电泳，超螺旋条带无显著降解。

使用方法：

1. 于冰上配置如下反应体系

2. 37℃孵育30 min；

3. 加入终浓度为11 mM的EDTA以停止反应；

4. 热失活条件为70℃孵育30 min；

5. 建议采用以下步骤回收处理后的样本： a. 使用 PCR 柱清洁； b. 进行琼脂糖凝胶电泳，然后胶回收DNA； c. 进行苯酚 / 氯仿萃取，后使用乙醇沉淀。

注意事项：

1.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！