RNase GG
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 | 价格 |
NBS8239 | RNase GG | 2500U(50U/μl) | 1250 |
产品简介:
本产品来源于嗜热古菌,经重组表达纯化后获得。RNase GG是一种核糖核酸内切酶,特异性识别并切割单链或双链RNA中的GG位点,不切割ssDNA、dsDNA。RNase GG对二级结构处的GG位点也可以高效切割,十分有利于分析存在复杂结构的RNA。RNase GG极度耐热,在37~95℃间均具有活性,在60~70℃活性最佳。RNase GG发挥活性不依赖于金属离子,可兼容大部分RNA研究中常用的缓冲液。
识别位点:GG
5'...G ↓ G ...3'
产品组成:
组分 | 规格 |
RNase GG (50 U/μl) | 50 μl |
10× RNase GG Buffer | 1 ml |
保存条件:
-20℃保存,2年有效。
建议反应条件:
1× RNase GG Buffer;60℃温育。
失活条件:
终浓度1% SDS,95℃3 min。
活性定义:
1个活性单位(U)是指在37℃下,30 min内完全切割2 pmol含有单个G/G位点的40 nt RNA底物所需的酶量。
蛋白纯度:
经SDS-PAGE 凝胶电泳检测,蛋白纯度不低于95%。
非特异性DNA内切酶活性:
37℃下,在20 μl反应体系中将50 U RNase GG与200 ng超螺旋质粒DNA共同温育4 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,少于20%的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。
RNase活性:
37℃下,在10 μl反应体系中将50 U RNase GG与不含GG位点的RNA共同温育1 h,使用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,RNA无变化。
DNase活性:
37℃下,在20 μl反应体系中将50 U RNase GG与15 ng双链 DNA片段共同温育16 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,双链DNA片段无变化。
使用方法:
1. 推荐体系
① 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:
RNA底物 | 10 μg |
10× RNase GG Buffer | 2 μl |
RNase GG (50 U/μl) | 1 μl |
RNase Inhibitor, Murine (40 U/μl)(可选) | 1~2 μl |
ddH2O | Up to 20 μl |
② 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),瞬时离心;
③ 60℃恒温孵育1 h,可根据不同的应用调节反应时间和酶的用量;
④(可选)终止反应:向反应体系中加入终浓度1%的SDS并95℃ 温育3 min。
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!