MazF 

产品简介：

MazF 是 E.coli 毒素 - 抗毒素系统中的毒素蛋白，特异性切断单链RNA 中 ACA 序列 5' 末端的核酸内切酶，不能切断双链 RNA、双链DNA 及单链 DNA。 

识别位点：

ACA
5'...↓ A C A ...3'

产品组成：

保存条件: 

-20℃保存，2年有效。

适用范围：

1. 高分辨率 m6A 甲基化分析；

2. mRNA 药物序列分析。

活性定义:

1活性单位 (U) 是指在37℃温度和pH7.5条件下，将1 pmol的标准底物 (ROX-5'

-GATAUACATATCT-eclipse；下划线部分是RNA 序列）在10 min内完全分解的酶量。

蛋白纯度：

经SDS-PAGE 凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于95%。

RNase活性：

将20 U MazF与 40 ng ssRNA 在 37℃温育1 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，ssRNA片段无变化。

DNase活性：

将20 U MazF与 15 ng双链DNA在37℃温育16 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，DNA片段无变化。

使用方法：

1. 推荐体系

① 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：

② ssRNA在37℃中保温15 min被完全切断。

注意事项：

1.      MazF特异性切断含ACA序列的ssRNA，但是也会受AC位点两侧序列的影响可能切断AC位点；

2.      MazF不能切断dsRNA。因此，由于RNA二级结构的影响，MazF不能切断所有的ACA位点序列；

3.      在反应液中添加盐，特别是Mg2+等二价阳离子时，MazF的活性会受到抑制。DTT不影响反应液中的酶活性；

4.      MazF切断的片段不能使用RNA Ligase直接进行连接反应，因为片段的两个末端分别是2', 3'-cyclic phosphate和 5'-OH。

5.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！