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PCR产物纯化试剂盒（离心柱法）

产品介绍 

本试剂盒采用独特的硅胶膜吸附柱纯化酶切、PCR等反应溶液中的DNA片段，最大限度的除去反应体系后多余的酶、dNTPS、无机盐离子及寡核 苷酸引物、缓冲体系等杂质，回收100bp-10kb DNA片段，回收率可达到80%以上，每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为30μg。也可用作DNA 的浓缩和纯化。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译实验。

注意事项 

1 使用前检查各组分是否出现沉淀。若有，请轻轻摇晃混合均匀，或37℃水浴重新溶解。 

2 实验前使用平衡液处理吸附柱，可以充分激活硅基质膜，提高得率。平衡液处理过的柱子，最好当天使用，放置时间过长会影响效果。 

3 洗涤液II使用前请按标签提示加入无水乙醇，并混合均匀。

使用流程

柱平衡步骤

向吸附柱 AP30中（吸附柱放入收集管中）加入500 μl平衡液，12,000rpm（~13,400×g）离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放 回收集管中。（请使用当天处理过的柱子）。

提取步骤

1 PCR反应或酶切反应结束后，将反应液移至干净的1.5ml离心管中，预估反应液的体积，向其中加入5倍体积的结合液，充分混匀。 

2 将吸附柱 AP30放入收集管中，将上一步混合溶液全部加入吸附柱AP30中，室温静置1-2min，使用常规台式离心机12,000rpm（ ~13,400×g）离心1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱AP30放入收集管中。（吸附柱容积为800 μl，若样品体积大于800μl，可分批加入） 

3 向吸附柱AP30中加入500 μl 洗涤液 II （请先检查是否加入无水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸 附柱AP30放入收集管中。 

4 重复操作步骤3。

5 将吸附柱AP30放入收集管中，12,000rpm（~13,400×g）离心2min，目的是将吸附柱中残余的洗涤液 II去除，否则残留洗涤液II中的乙 醇会影响后续的实验如酶反应等。 

6 将吸附柱AP30置于一个干净的离心管中，向吸附柱膜的中间部位悬空滴加50-100 μl洗脱液，室温放置2min，12,000rpm（~13,400×g） 离心2min，将产物溶液收集到离心管中，如不立即进行下游实验，于-20℃保存备用。

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