间充质干细胞成软骨分化染色试剂盒

Chondro-dye for chondrocytes staining kit in chondrogenic differentiation

【包装规格】

【预期用途】

适用于间充质干细胞成软骨分化后的细胞染色，尤其适合作为BI MSCgo^TM Chondrogenic XF (BI 05-220-1B & 05221-1D)成软骨分化后的染色验证之用。

【检验原理】

阿尔新蓝8GX(Alcian Blue 8GX)是阿尔新蓝(Alcian Blue)家族的一种，广泛用于酸性多糖(Acidic polysaccharides)的染色，例如软骨(Cartilages)或其他组织中的糖胺聚糖(Glycosaminoglycans)以及细胞分泌的外被多糖(Glycocalyx)等。在成软骨诱导分化作用下，间充质干细胞(MSC,MesenchymalStemCell)会被诱导成为软骨细胞(Chondrocytes)。软骨细胞外具有一层富含蛋白多糖(Aggrecan)的基质，是成软骨分化的标志物，可被阿尔新蓝染成蓝色或蓝绿色。

【主要组成成分】主要成分为阿尔新蓝(AlcianBlue)。

【适用范围】

间充质干细胞成软骨分化后的染色验证。

【样本要求】

待检的样本应为间充质干细胞成软骨分化后的软骨细胞。推荐使用BI MSCgo^TM Chondrogenic XF进行成软骨分化诱导。

【使用方法】

以操作一个T25flask为例：

1.吸弃分化培养基，加入1mlDPBS(VCC3590-0500)轻轻润洗培养瓶底面。

2.吸弃DPBS，加入3mlFixationSolution(C37B1-0020)，轻轻晃动培养瓶，使底面浸润均匀。室温下静置30分钟。

3.吸弃Fixationsolution,加入3mlWashI(C37B2-0050)，润洗细胞，静置2-3分钟。

4.吸弃WashI，加入3mlStainingSolution(C37B3-0020)，底面浸润均匀，室温避光染色过夜。

5.吸弃StainingSolution，加入3mlSolutionWashII(C37B4-0050)，润洗细胞。

6.吸弃WashII，重复第5步，再次漂洗细胞(如若上清依然很蓝，可延长漂洗时间或再漂洗一次。注意：不要把细胞冲下来)。

7.吸弃WashII，加入1mlInspectionSolution(C37B5-0010)，置于显微镜下观察、拍照。

【检验结果的解释】

在显微镜下，可观察到软骨细胞被阿尔新蓝染成蓝色(如下图所示)。染色的深度会受到多种因素的影响，例如：细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条件等。

【储存条件及有效期】

本产品应在2-8°C储存，并在产品标签上注明的有效期内使用。有效期为18个月。蓝冰运输。

【注意事项】

1.严禁内服，不能用嘴吸液。

2.试剂包装如有破损，严禁使用。

3.操作人员在检验时应做好防护。

4.与皮肤、粘膜接触，请立即用自来水冲洗。

5.禁止使用超出规定有效期的产品。

仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。