间充质干细胞成脂分化染色试剂盒

Adipo-dye for adipocytes staining kit in adipogenic differentiation

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【包装规格】

【预期用途】

适用于间充质干细胞成脂分化后的脂肪细胞染色，尤其适合作为BI MSCgo^TM  Adipogenic XF (BI 05-330-1-1B & 05-3311-01 & 05-332-1-15)成脂分化后的染色验证之用。

【检验原理】

油红O染料(OilRed-O)属于苏丹染料家族的一员，是一种脂溶性的偶氮染料。由于显色明显，便于观察，广泛用于脂肪染色。在成脂分化作用下，间充质干细胞(MSC,MesenchymalStemCell)会先后诱导分化为前成脂细胞(Preadipocytes)和脂肪细胞(Adipocytes)，后者聚集着大大小小的脂肪滴(Lipiddroplets)。油红O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度，因而使脂肪着色，呈现红色或橘红色。

【主要组成成分】

主要成分为油红O。

【适用范围】

间充质干细胞成脂分化后的脂肪细胞染色验证。

【样本要求】

待检的样本应为间充质干细胞成脂分化后形成的脂肪细胞。推荐使用BI MSCgo^TM Adipogenic XF进行成脂分化诱导。

【使用方法】

以操作一个T25flask为例：

染色前准备，将Adipo-Staining A(C37A3-0012)与Adipo-Staining B(C37A4-0008)按3:2的体积比混合，即为染色工作液(Working Staining Solution)，每个T25培养瓶需用3ml染色工作液。每次使用现用现配，3小时内使用。

1.吸弃分化培养基，加入1ml DPBS(VC C3590-0500)轻轻润洗培养瓶底面。

2.吸弃DPBS，加入3ml Adipo-Fixation(C37A1-0020)，轻轻晃动培养瓶，使底面浸润均匀。室温下静置30分钟。

3.吸弃Adipo-Fixation，加入3ml Adipo-WahI(C37A2-0050)，润洗底面，静置2-3分钟。

4.吸弃Adipo-WashI，加入3ml Staining Solution，均匀浸润底面，室温静置染色30分钟。

5.吸弃Staining Solution, 加入3ml Adipo-WashII(C37A5-0050)，润洗底面。

6. 吸弃Wash II，重复第5步，再次漂洗细胞 (如若上清依然很红，可延长漂洗时间或再漂洗一次。注意：不要把细胞冲下来)。 

7. 吸弃 Wash II ，加入 1 ml Adipo Inspection (C37A6-0010)，置于显微镜下观察、拍照。

【检验结果的解释】

在显微镜下，可观察到脂肪细胞内的油脂滴与油红染料结合呈现出明显的红色或深红色(如下图所示)。被染色细胞的数量和染色的深度会受到多种因素的影响，例如：细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条件等。

【储存条件及有效期】

本产品应在2-8°C储存，并在产品标签上注明的有效期内使用。有效期为18个月。蓝冰运输。

【注意事项】

1.严禁内服，不能用嘴吸液。

2.试剂包装如有破损，严禁使用。

3.操作人员在检验时应做好防护。

4.与皮肤、粘膜接触，请立即用自来水冲洗。

5.禁止使用超出规定有效期的产品。

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仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。