间充质干细胞成骨分化染色试剂盒

Osteo-dye for osteocytes staining kit in osteogenic differentiation

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【包装规格】

【预期用途】 

适用于间充质干细胞成骨分化后的骨细胞染色， 尤其适合作为BI MSCgo^TM Osteogenic XF ( BI 05-440-1B 或 05-442-1B) 成骨分化后的染色验证之用。 

【检验原理】 

茜素红 S (Alizarin Red S) 是一种常用的示钙染剂，广泛用作生物医学样本中含钙目标物的染色检验。游离的钙离子可与茜素红 S 形成红色沉淀；固着的钙则会被直接染成红色。 在成骨诱导分化作用下，间充质干细胞 (MSC, Mesenchymal Stem Cell) 会被逐渐分化为骨细胞(Osteoblasts)，包括钙化骨节(钙盐结晶体) 的形成 (Calcium nodules formation) 和细胞的泌钙反应 (Calcium secretion)。两者均可被茜素红S染成红色。 

【主要组成成分】 

主要成分为茜素红S。 

【适用范围】 

间充质干细胞成骨分化后的骨细胞染色验证。 

【样本要求】 

待检的样本应为间充质干细胞成骨分化后形成的骨细胞。推荐使用 BI MSCgoTM Osteogenic XF 进行成骨分化诱导。 

【使用方法】 

以操作一个T25 flask为例： 

1. 吸弃分化培养基，加入 1 ml DPBS (VC C3590-0500) 轻轻润洗培养瓶底面。 

2. 吸弃 DPBS，加入 3 ml Fixation solution (C37C1-0020)，轻轻晃动培养瓶，使底面浸润 均匀。室温下静置30 分钟。 

3. 吸弃Fixation solution ；加入3 ml Wash I (C37C2-0050)，润洗细胞2-3次。 

4. 吸弃Wash I，加入3 ml Staining Solution (C37C3-0020)，底面浸润均匀，室温染色30分 钟。 

5. 吸弃Staining Solution，加入 3 ml Wash II (C37C4-0050)，润洗细胞2-3次。 

6. 吸弃 Wash II，加入 1 ml Inspection Solution (C37C5-0010)，置于显微镜下观察、 拍照 (分化后的骨细胞会被染成橘红色)。

【检验结果的解释】 

在显微镜下，可观察到钙化骨节与茜素红染料结合后呈现红色或橘红色（如下图所示）。被染色细胞的数量和染色的深度会受到多种因素的影响，例如：细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条件等。

【储存条件及有效期】 

本产品应在 2-8°C 储存，并在产品标签上注明 的有效期内使用。 有效期为18个月。 蓝冰运输。

【注意事项】 

1. 严禁内服，不能用嘴吸液。 

2. 试剂包装如有破损，严禁使用。 

3. 操作人员在检验时应做好防护。 

4. 与皮肤、粘膜接触，请立即用自来水冲洗。 

5. 禁止使用超出规定有效期的产品。 

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仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。