<NBS4925> EZ poly-3000™Transfection Reagent/EZ poly-3000™转染试剂

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<NBS4925> EZ poly-3000™Transfection Reagent/EZ poly-3000™转染试剂

EZ poly-3000™Transfection Reagent/EZ poly-3000™转染试剂
货号:NBS4925-1.5mL
品牌:NoninBio
促销: 3500.00
价格: 4375.00
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EZ poly-3000TM转染试剂

 

产品目录

EZ poly-3000TM

Enhancer(增强剂)

存储温度

NBS4925-0.75mL

0.75mL

0.75mL

4℃

NBS4925-1.5mL

1.5mL

1.5mL

4℃

 

产品介绍

EZ poly-3000TM转染试剂是一种基于脂质体作为体内和体外输送载体的工具,通过包裹DNA或RNA形成复合物,并导入到各种不同类型的贴壁和悬浮细胞内。EZ poly-3000TM转染试剂提供了出色的转染性能,在面对各种难转染的细胞同样保持高效率的转染效果,以及提高了细胞存活率。EZ poly-3000TM转染试剂经过与Lipofectamine@3000同比测试具有一样出众的转染效果,同样适用于针对血清原代细胞进行DNA和RNA转染。

 

产品特点

·优越的转染效率-适用于广泛类型的细胞,包括难转染细胞。

·抗干扰出色-无需移除细胞培养物中的血清和培养基。

·使用方便-转染后无需清洗或更换培养基。

·细胞毒性低-作用温和,对细胞友好。

 

操作说明

请使用下面步骤在24孔培养板进行DNA转染到哺乳动物细胞。其他类型培养板的使用,请查阅说明书中提供的“转染稀释比例参考”,提供了对应培养板的参考用量。如仍需进一步优化,请参阅说明书中提供的“优化转染参考”。

1.贴壁细胞:转染前一天,将0.5-2x105细胞置于500μl不含抗生素的生长培养基中,使转染时接种细胞达到70-90%的汇合度。

悬浮细胞:加入DNA-脂质体复合物之前,将4-8x105细胞置于500μl不含抗生素的生长培养基中。

2.对于每个转染样品,制备DNA-脂质体复合物如下:

a. 使用25μl Opti MEM@培养基稀释1μl EZ poly-3000TM(组分A), 充分混匀,室温下待用。

b. 使用25μl Opti MEM@培养基(培养基不含血清)稀释0.5μg DNA,然后添加1μl增强剂试剂(Enhancer成分B)。充分混匀,制备成DNA/增强子混合物,室温下待用。

c. 把DNA/增强子混合物加入到制备好的EZ poly-3000TM中(总体积=50μl)。轻轻充分混匀,在室温下培养10-15分钟。

3. 加入50μl DNA-脂质体混合物到培养板每孔的细胞中,轻轻充分混匀。

4. 在培养箱37℃孵育24天。然后分析转染细胞。如有需要,4-6小时后更换培养基。

 

优化转染参考

为了获得最高的转染效率和低细胞毒性,通过改变细胞密度以及DNA和EZ poly-3000TM来优化转染条件试剂浓度。确保细胞汇合率大于90%,并改变DNA(μg): EZ poly-3000TM试剂(μl):增强剂试剂(μl)比例为1:1:2至1:4:2。

 

转染稀释比例参考

要以不同的组织培养形式转染细胞,请改变EZ poly-3000TM试剂、增强剂试剂(Enhancer)、核酸、细胞和培养基的用量按相对表面积的比例使用,如表所示。

Culture

Plates

Surface

Area (cm²)

Plating

Medium
Volume

Dilution Medium Volume

DNA Transfection

siRNA Transfection

DNA

EZ poly-3000 Reagent

Enhancer

siRNA

EZ poly-3000

Reagent

96-well

0.3

100μl

2x5μl

0.1μg

0.15-0.3μl

0.2μl

3 pmol

0.3μl

24-well

2

500μl

2x25μl

0.5μg

0.75-1.5μl

1μl

15 pmol

1.5μl

12-well

4

1ml

2x50μl

1.0μg

1.5-3.0μl

2μl

30 pmol

3.0μl

6-well

10

2mL

2x125μl

2.5μg

3.75-7.5μl

5μl

75 pmol

7.5μl