<NW3201> 外泌体荧光染料(DiR)

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<NW3201> 外泌体荧光染料(DiR)

外泌体荧光染料(DiR)
货号:NW3201
规格:200 μL(1 mM)
品牌:NoninBio
促销: 500.00
价格: 625.00
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NW3201
200 μL

 

外泌体荧光染料(DiR)

 

产品编号

产品名称

包装规格

NW3201

外泌体荧光染料(DiR)

200 μL(1mM)

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产品简介:

DiR是一种亲脂性的近红外荧光花青染料。其两个18-碳链可以与细胞膜或亲脂性生物分子结合,从而进行特定、稳定的染色。DiR所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织,所以常用于活体成像和示踪。

 

产品特性:

1.      分子式:C63 H101 IN2

2.      分子量:1013.4

3.      溶剂:DMSO 

4.      λex/λem(MeOH) = 748/780 nm

 

保存条件: 

-20℃避光保存,1年有效。

 

产品使用:

一、 染料工作液制备

将“外泌体荧光标记染料(DiR)”用1×PBS稀释10 倍,配制成浓度为100 μM的染料工作液。

二、 外泌体染色

1.      在外泌体悬液中加入染料工作液,建议染料终浓度为 10~20 μM(按照终体积的1/5~1/10加入100 μM的染 料工作液);

2.      加入染料工作液后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀 1 min,再放置于37℃孵育30 min;

3.      向孵育后的外泌体-染料复合物中加入10 mL的1×PBS 混匀;

4.      按照外泌体提取方法再次提取外泌体以去除游离染料;

5.      取200 μL 1×PBS重悬沉淀物,即为染色后的外泌体。

 

注意事项:

1.      荧光染料均存在淬灭问题,请注意避光,以减缓荧光淬灭。

2.      染料工作液应现配现用,不能提前配制,否则将影响染色效果。

3.      DiR染色固定细胞或组织样品时,样品宜使用4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

4.      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

常见问题:

1.      活体成像对外泌体浓度要求较高,建议用于染料标记的外泌体原始浓度达到0.5~1.5 μg/μL,外泌体浓度过低实验失败风险较高。

2.      外泌体染色步骤中去除游离染料的第3、4步必不可少,以避免游离染料对后期实验的干扰。这一步相当于重新提取外泌体,所有外泌体提取纯化方式都适用。

3.      DiR碘化物(DiR染料)的发射波长肉眼不可见,需要使用配备CCD镜头或其他设备的近红外检测仪器,建议使用活体成像仪。

4.      建议染料标记的外泌体在注射后24 h内设置梯度时间 进行观测,多数情况下,在注射后2~8 h荧光强度达到峰值。为保证观察结果,小动物需要做剃毛处理。

5.      由于以下两个原因,建议制备2倍于活体成像或示踪实验所需外泌体量以进行染料标记:1)外泌体染色效率难 以达到100%;2)在去游离染料过程中无法避免外泌体的损失。

 

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