<NW3217> 外泌体绿色荧光标记染料(PKH67)

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<NW3217> 外泌体绿色荧光标记染料(PKH67)

外泌体绿色荧光标记染料(PKH67)
Exosome Green Fluorescent labeling dye(PKH67)
货号:NW3217
规格:20 μL(1mM)
品牌:NoninBio
促销: 750.00
价格: 750.00
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NW3217
20 μL

 

外泌体绿色荧光标记染料(PKH67

Exosome Green Fluorescent labeling dyePKH67

 

产品编号

产品名称

包装规格

NW3217

外泌体绿色荧光标记染料(PKH67

20μL1mM

 【温馨提示】:见我司整理的专注外泌体研究,外泌体提取专家,专注外泌体提取试剂盒产品专题。


产品简介:

荧光染料PKH67 是⼀种可对体外和体内细胞示踪的绿色荧光染料,通过与膜结构的脂质分子结合到细胞膜脂质区域上。PKH67对细胞毒性较小,荧光背景低,脂溶性高,能够轻易穿透细胞膜,有着强而稳定的绿色荧光。该试剂可以在染色过程中增加染色效率,同时维持细胞活力。可用于外泌体的标记染色实验,监测细胞吞噬作用

 

产品组成:

组分

名称

规格

A

PKH67 linkerfor green fluorescent cell labeling

20 μL

B

Diluent Cfor General Membrane Labeling

200 μL

荧光波长:λex 490 nm;λem 502 nm

 

保存条件

2-8避光(一年有效)

 

产品使用:

一、外泌体蛋白定量:

取适量外泌体进行 BCA 蛋白浓度测定以确定外泌体蛋白量;

二、染料工作液制备:

用“Diluent C”将“PKH67 linkerfor green fluorescent cell labeling)” 储存液稀释10倍,配制浓度为100 μM 的染料工作液(避光操作,工作液应根据实验用量适当配制,现配现用);

三、外泌体染色:

1.      在外泌体中加入染料工作液,建议加入剂量如下:

外泌体蛋白量

加入染料工作液剂量

10 - 200 μg

50 μL

200 - 500 μg

100 μL

500 - 1000 μg

200 μL

2.      加入染料工作液后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再静置孵育10min

3.      向孵育后的外泌体-染料复合物中加入10 mL1×PBS混匀;

4.      按照外泌体提取方法再次提取外泌体以去除多余染料;

5.      200μL 1×PBS重悬沉淀物,沉淀即为染色后的外泌体。

注意:过度染色会导致外泌体膜完整性丧失,最佳PKH67染料/外泌体用量需根据自身实验而决定。

 

注意事项:

1PKH67 母液易水解,建议分装保存,分装后用封口膜密封保存;

2PKH67 工作液应现配现用,不能提前配制,否则将影响染色效果;

3PKH67 溶解液在较低温度下会凝固而粘在管底内,可以 37℃水浴片刻至全部融解后使用。

 

常见问题:

1.      建议用于染料标记的外泌体原始浓度达到 0.5~1 μg/μL。外泌体浓度过低实验失败风险较高。

2.      外泌体染色步骤中去除游离染料的步骤必不可少,以避免游离染料对后期实验的干扰。这一步相当于重新提取外泌体,所有外泌体提取纯化方式都适用。

3.      染料标记外泌体与细胞共孵育的培养条件尽可能使用无血清培养基,以提高细胞对染料标记外泌体的摄取效率,共孵育参考时长为2~24 h

4.      本染料也可用于细胞膜染色,参考剂量染料浓度为2 μM,细胞浓度为1×107 cells/mL

5.      由于外泌体染色效率难以达到100%,且在去除游离染料过程中无法避免外泌体的损失,因此,建议制备2倍于共孵育实验所需外泌体量以进行染料标记实验。

 

本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!

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