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  • MitoPerOx是一种比率型的荧光探针,用于评估线粒体的脂质过氧化变化。MitoPerOx由Murphy et al.对细胞脂质过氧化探针-C11-BODIPY 581/591(货号:NBS5113-1mg)改造而来,包含一氟化硼二吡咯(BODIPY)荧光素偶联物,通过二烯基连接到一苯基上。线粒体定位结构-三苯基膦亲脂性阳离子的引入使其在线粒体膜电位的驱使下,能被活细胞选择性摄取进入线粒体。MitoPerOx能非常快速的进入细胞内的线粒体,随着线粒体脂质过氧化变化产生的反应能用荧光光度计、共聚焦显微镜、落射活细胞成像仪来检测。MitoPerOx的最大激发波长为495nm,一旦线粒体脂质过氧化,最大发射波长从590nm迁移到520nm,使其能比率型测定活细胞的脂质过氧化水平。
  • MCLA,又称为6-(4-Methoxyphenyl)-2-methyl-3,7-dihydroimidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one hydrochloride,能够与超氧化物阴离子(O2–)或单线态氧(1O2)反应产生化学发光。MCLA与超氧化物可逆反应形成一加合物,该加合物的不可逆衰变产生冷光(~465nm),此反应表观速率常数是~105M–1s–1。MCLA化学发光是灵敏的超氧化物检测手段,最显著的应用是白细胞功能研究。
  • 五氟苯磺酰基荧光素(Pentafluorobenzenesulfonyl fluorescein, PBSF),是由Maeda和合作者设计且开发的一款过氧化氢选择性探针(Selective H2O2probe),不同于绝大多数的活性氧检测探针,PBSF以一种非氧化的机制发挥功能。一旦与过氧化氢(H2O2)发生反应,PBSF上的磺酸基连接被水解,释放出荧光素,从而荧光信号显著增强(作用机理见下图)。PBSF选择性检测H2O2,不会识别羟基自由基(OH•)、叔丁基过氧化氢(TBHP)、超氧阴离子自由基(O2-)、单线态氧(1O2)和硝酸盐。PBSF已用于细胞、细菌和植物的过氧化氢检测。
  • 过氧化氢(Hydrogen peroxide, H2O2)是一种反映氧代谢副产物,用于许多氧化应激相关态的关键调节剂,参与人体大量的生理和病理活动,比如哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、神经性衰退疾病和唐氏综合征等,但目前对H2O2生成、积累、运输和功能的分子机制仍了解很少,最大的限制在于缺乏灵敏且特异性H2O2探针,用于活细胞研究。目前能得到的H2O2反应性探针的缺陷包括1)来自其他ROS比如过氧亚硝基阴离子(ONOO-)、过氧化基(ROO•)、超氧化物(•O2–)的背景荧光干扰;2)对外源活化酶的需求;3)水缺乏水溶性或不兼容于水溶体系;4)以及紫外区域的激发光谱特征等。
  • BCIP(5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate,5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸)和NBT(Nitrotetrazolium blue chloride,氯化硝基四氮唑蓝)是碱性磷酸酶最佳的发色底物组合之一,产物为深蓝色。在碱性磷酸酶的催化下,BCIP被水解产生强反应性的产物,此产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT甲臜。组织化学研究正是利用此原理,组织切片上结合碱性磷酸酶偶联物的地方能产生深蓝色沉淀,则根据颜色反应来确定目的蛋白的位置和表达情况。
  • BCIP,英文全名5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate,中文全名5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸,常与NBT(氯化硝基四氮唑蓝)联合用来碱性磷酸酶标记分子的显色检测。在碱性磷酸酶的催化下,BCIP被水解产生强反应性的产物,此产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT甲臜(NBT-formazan),从而起到显色作用。BCIP/NBT底物显色系统非常灵活,且应用广泛,包括Northern,Southern和Western Blot,以及原位杂交和免疫组化实验。
  • BCIP,英文全名5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate,中文全名5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸,常与NBT(氯化硝基四氮唑蓝)联合用来碱性磷酸酶标记分子的显色检测。在碱性磷酸酶的催化下,BCIP被水解产生强反应性的产物,此产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT甲臜(NBT-formazan),从而起到显色作用。BCIP/NBT底物显色系统非常灵活,且应用广泛,包括Northern,Southern和Western Blot,以及原位杂交和免疫组化实验。 本品为BCIP的对甲苯胺盐形式,CAS NO. 6578-06-94,溶于DMF(20mg/ml),不溶于水。
  • NBT,英文全名Nitrotetrazolium blue chloride,中文全名氯化硝基四氮唑蓝,也称为蓝四氮唑,CAS NO. 298-83-9,是还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶(NADPH diaphorase,NADPH-黄递酶)的作用底物,竞争性抑制一氧化氮合成酶(NOS)活性,IC50=3-4μM。
  • 2,3,5-氯化三苯基四氮唑,又称四唑红,简称TTC,TTZ,或TPTZ,一种脂溶性光敏感复合物,既可用来检测种子的生存能力,也可用来检测哺乳动物组织的缺血梗塞。检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂,活细胞内的脱氢酶(尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶)可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF(1,3,5-triphenylformazan)。对于种子或者植物组织来说,染色结果为活组织被染成不同程度的红色,死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织,因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色,而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为2%(w/v),也可根据组织类型做浓度的适当调整。
  • 碘硝基氯化四氮唑(Iodonitrotetrazolium Chloride, INT)用作脱氢酶比色法测定中的电子受体,包括:乳酸脱氢酶(LDH)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)、乳酰-CoA脱氢酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)、BBM II乙酮醇异构酶、组氨醇脱氢酶和各种其他水解酶。INT一旦被还原产生一种紫色甲臜产物,这一产物基本不溶于水,能够肉眼被观察到,或用乙醇或有机溶剂提取后用吸光光度法测定。INT通常用来测定各种背景下的微生物呼吸活性。