DYKDDDDK肽段是融合蛋白表达纯化过程中最常用的标签(tag)之一,DYKDDDDK 肽段也经常被称为 Flag肽段,是 Sigma公司的注册商标。它可以连接在融合蛋白的 N 端、C端或序列中间,具有极好的亲水性,更容易展示在融合蛋白的表面,干扰融合蛋白功能的可能性较小。这一标签还具有一个优势:连接在目的蛋白N端时,可以被 Enterokinase(EKprotease)从序列C端赖氨酸的位置切除,而不留下冗余残基。抗 DYKDDDDK 标签的抗体能对 DYKDDDDK 标签融合蛋白进行准确的检测和纯化,通过一定的工艺将辣根过氧化物酶 (HRP)偶联至DYKDDDDK标签抗体上,进行 WB 实验时加入发光液 A和 B,一般是鲁米诺和过氧化氢,在辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用下,鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物,过氧化物不稳定随即分解,形成一种能发光的电子激发中间体,当后者由激发态返回至基态,就会产生荧光,实现对 DYKDDDDDK 标签融合蛋白快速检测。