化学法热启动Taq DNA 聚合酶

Taq-HS DNA Polymerase

产品简介：

  Taq-HS DNA polymerase是使用小分子化合物修饰的热启动Taq DNA Polymerase。在 60℃以下化合物可以有效封闭 DNA 聚合酶活性，高温下发生不可逆解离，使聚合酶恢复活性，从而有效避免低温下的非特异性扩增。本品主要用于荧光定量PCR，尤其是 Taqman 探针法。

产品组成：

保存条件: 

-20℃保存，2年有效。

活性定义:

1个活性单位(U) 定义为74℃下，30 min内催化10 nmol dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

蛋白纯度检测：

使用SDS-PAGE凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于95%。

核酸内切酶活性检测：

将5 U Taq-HS DNA polymerase与200 ng超螺旋质粒DNA在 37℃下，共同温育4 h后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于10%的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。

非特异性核酸酶活性检测：

将5 U Taq-HS DNA polymerase与15 ng双链DNA片段在 37℃温育16 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测双链DNA底物无变化。

宿主DNA残留检测：

使用大肠杆菌16S rDNA特异性引物探针组，采用荧光定量PCR 法检测5 U Taq-HS DNA polymerase，大肠杆菌宿主基因组DNA残留低于1 copy。

使用方法：

1. 探针法荧光定量PCR反应体系

a. 引物推荐终浓度为 0.2 μM，效果不佳时可以在0.1~1 μM进行调整；引物长度请设定 18~25 bp，GC含量为40%~60%。最佳效率的扩增目标片段一般为80~200 bp，设计时应尽量避免发夹结构、二聚体等复杂结构，并尽可能横跨内含子区域。

b. 探针终浓度推荐为0.25 μM，效果不佳时可以在0.1~1 μM进行调整。

c. 模板添加量不应超过总反应体系的10%，推荐加样量为1~2 μl。不同种类DNA模板中含有的靶基因拷贝数目不同，必要时可进行梯度稀释，以确定最佳的DNA模板添加量。

2. 探针法荧光定量PCR反应程序

步骤	温度	时间
预变性	95℃	2 min
变性	95℃	10 s		40 Cycles
退火&延伸	60℃	30 s

注意事项：

1.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！