<BK0026> ACE 磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒(预分装)

栏目:核酸提取纯化
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磁珠法植物基因组 DNA 提取试剂盒为经济植物样本的基因组 DNA 快速制备提供了一个简单快速的解决方案。该试剂盒采用独特的缓冲液系统,充分裂解植物细胞释放基因,再通过醇介导将基因结合于纳米磁珠表面,经洗杂液洗去蛋白等杂质,最后在低盐条件下洗脱得到高纯的基因组 DNA。


磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒(预分装)

产品线

产品目录名称

规格

货号

目录价

核酸提取纯化

磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒(预分装)

64 T

BK0026-01

445

产品介绍 

磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒为经济植物样本的基因组DNA快速制备提供了一个简单快速的解决方案。该试剂盒采用独特的缓冲液系 统,充分裂解植物细胞释放基因,再通过醇介导将基因结合于纳米磁珠表面,经洗杂液洗去蛋白等杂质,最后在低盐条件下洗脱得到高纯的基因 组DNA。提取过程无需使用有毒的酚、氯仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀。提取的产物可用于PCR、载体构建、核酸杂交、高通量测序、转基 因检测等下游实验。


试剂名称

64 T

裂解液 PA

25 ml

裂解液 PB

3.5 ml

RNase (20 mg/ml)

2.8 ml

DTT

1.2 ml

沉淀缓冲液

9 ml

MagET™ 植物DNA预分装试剂板

1*4

MagET™ 8孔磁棒套

2*4


注意事项 

1 使用前检查各组分是否出现沉淀。若有,请轻轻摇晃混合均匀,或37℃水浴重新溶解。 

2 RNase(20mg/ml) 请置于-20℃保存。 

3 使用前请将1ml DTT全部加入到裂解液 PA中去,并置于4℃保存,保质期6个月。 

4 沉淀缓冲液使用前请放置冰上预冷。


使用流程

样本预处理

1 对于纤维含量高的植物组织样本,将样本加入液氮研磨或使用组织研磨杵研磨成粉末;对于纤维含量低的植物组织,将组织剪碎成小块。 

2 称取预处理好的植物组织样本50-100 mg,迅速将样本加入预先装有裂解液 PA(已加入DTT)的离心管中,用枪头吹打均匀后,依次加入 40 μl RNase(20mg/ml) 、50 μl 裂解液 PB 涡旋混匀,65℃孵育10-30 min。种子样本建议起始用量10 mg。 

3 向上一步离心管中加入130 μl 沉淀缓冲液,震荡混匀,直至出现沉淀。 

4 12,000 rpm(~13,400×g),离心5 min,使用移液器小心将全部上清转移到新的离心管中。


自动化法提取- MagET™ Smart 16

1 取出MagET™ 植物DNA预分装试剂板,颠倒混匀数次使磁珠重悬,轻甩MagET™ 植物DNA预分装试剂板使试剂及磁珠集中到孔板 底部。

注:使用前小心撕去铝箔封口膜,避免MagET™ 植物DNA预分装试剂板剧烈振动,防止液体溅出。 

2 将之前预处理的全部上清液转入MagET™ 植物DNA预分装试剂板的第2,8列,将MagET™ 植物DNA预分装试剂板置于 MagET™ Smart 16底座上。

注:请在加样后1 h内上机运行程序。

3 将MagET™ 8孔磁棒套插入MagET™ Smart 16核酸提取仪磁棒套架卡槽内。 

4 选择程序并运行,自动化程序结束后,取下MagET™ 8孔磁棒套丢弃。取出MagET™ 植物DNA预分装试剂板,使用移液器从MagET™ 植物DNA预分装试剂板的第6,12列吸取出洗脱产物,即得植物基因组DNA。如不能及时进行下游试验,DNA样本可短期保存于-20℃

表1.MagETTM Smart 16 程序设定

流程

工作孔位

名称

时长

幅度

频率

磁吸时间

转移等待

温度

加热时间

1

1

取磁珠

1min

最大

最快

60s

0

-

0

2

2

结合

5min

较大

较快

90s

0

-

0

3

3

洗杂

1min

较大

较快

60s

0

-

0

4

4

洗杂

1min

较大

较快

60s

0

-

0

5

5

洗杂

1min

较大

较快

60s

120s

-

0

6

6

洗脱

5min

较大

较快

90s

0

-

0

7

1

弃磁珠

1min

最大

最快

0

0

-

0