<BK0022> ACE 磁珠法质粒DNA小量提取试剂盒(预分装)

栏目:核酸提取纯化
分享到:
磁珠法质粒DNA抽提试剂盒采用经典的SDS碱裂解法充分裂解释放质粒,再通过醇介导将质粒结合于纳米磁珠表面,经洗杂液洗去蛋白等杂质,最后洗脱得到高纯的质粒产物。产物可用于酶切、转化、PCR、测序等分子生物学实验。


磁珠法质粒DNA小量提取试剂盒(预分装)

产品线

产品目录名称

规格

货号

目录价

核酸提取纯化

磁珠法质粒DNA小量提取试剂盒(预分装)

64T

BK0022-01

160

产品介绍

磁珠法质粒DNA抽提试剂盒采用经典的SDS碱裂解法充分裂解释放质粒,再通过醇介导将质粒结合于纳米磁珠表面,经洗杂液洗去蛋白等杂质, 最后洗脱得到高纯的质粒产物。产物可用于酶切、转化、PCR、测序等分子生物学实验。

试剂名称

64 T

溶液 P1

7 ml

溶液 P2

7 ml

溶液 P3

7 ml

RNase (20 mg/ml)

700 μl

MagET™ 质粒DNA预分装试剂板

1*4

MagET™ 8孔磁棒套

4*2


注意事项 

1 使用前检查各组分是否出现沉淀。若有,请轻轻摇晃混合均匀,或37℃水浴重新溶解。 

2 使用前请将 RNase(20mg/ml) 全部加入溶液 P1中,用完置于4℃保存。


使用流程 

样本预处理 

1 取1-5ml 细菌培养物,加入离心管中,使用常规台式离心机12,000rpm(~13,400×g)离心1-5 min ,尽量吸尽上清。(菌液较多时可以通过 多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。

2 向留有菌体沉淀的离心管中加入100μl 溶液P1(请先检查是否加入RNase),使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀将菌体充分悬浮。

注意:如果菌体未彻底混匀,质粒提取量和纯度会偏低。

3 向离心管中加入100 μl 溶液 P2,温和的上下翻转6-8次使菌体充分裂解,室温静置1~ 5 min(时间不宜过长),以免质粒DNA受到破坏 。

4 向离心管中加入100 μl 溶液 P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。12,000rpm(~13,400×g)离心 5min,小心吸取全部上清,备用。

自动化法提取 -MagET™ Smart 16 

1 取出MagET™ 质粒DNA预分装试剂板,颠倒混匀数次使磁珠重悬,轻甩MagET™ 质粒DNA预分装试剂板使试剂及磁珠均集中到试剂 板底部。

注:使用前小心撕去铝箔封口膜,避免MagET™ 质粒DNA预分装试剂板振动,防止液体溅出。

2 在MagET™ 质粒DNA预分装试剂板的第 2,8列中加入预处理的全部上清液,将MagET™ 质粒DNA预分装试剂板置于 MagET™ Smart 16的底座上。

注:请在加样后 1h 内上机运行程序。

3 将MagET™ 8孔磁棒套插入 MagET™ Smart 16磁棒套架卡槽内。

4 选择程序并运行,自动化程序结束后,取下MagET™ 8孔磁棒套丢弃,拿出MagET™ 质粒DNA预分装试剂板,使用移液器从MagET™ 质粒DNA预分装试剂板的第6,12列吸取出产物,即为质粒 DNA产物。如不能及时进行下游试验,质粒DNA 样本可短期保存于 -20℃。

表1.MagETTM Smart 16 程序设定

流程

工作孔位

名称

时长

幅度

频率

磁吸时间

转移等待

温度

加热时间

1

1

取磁珠

1min

最大

最快

60s

0

-

0

2

2

结合

5min

较大

较快

90s

0

-

0

3

3

洗杂

1min

较大

较快

60s

0

-

0

4

4

洗杂

1min

较大

较快

60s

120s

-

0

5

6

洗脱

5min

较大

较快

90s

0

-

0

6

1

弃磁珠

1min

最大

最快

0

0

-

0