磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(单条孔)
产品线 | 产品目录名称 | 规格 | 货号 | 目录价 |
核酸提取纯化 | 磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(单条孔) | 48 T | BK0015-01 | 143 |
产品介绍
本试剂盒采用高效、专一结合DNA的硅基磁珠和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其他有机化合 物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,回收100 bp-10 kb DNA片段,回收率高达80%。回收的DNA 片段可直接用于酶切、连接、PCR 扩增、二 代测序、文库筛选、连接和转化等下游生物实验。
试剂名称 | 48 T |
MagET™ DNA回收预分装试剂条 | 16*3 |
洗脱液 | 5 ml |
MagET™ 洗脱管 | 48 |
MagET™ 4孔磁棒套 | 2*6 |
注意事项
1 使用前检查各组分是否出现沉淀。若有,请轻轻摇晃混合均匀,或37℃水浴重新溶解。
2 电泳时使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
3 如下一步实验要求较高,则尽量使用TAE电泳缓冲液。
4 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
使用流程
样品预处理
将单一的目的 DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下,尽量切除多余部分,放入干净的离心管中,称重。胶浓度为1%时,重量≤300 μg,胶块浓度为 3%时,重量≤100 μg。
自动化法提取 -MagET™ Smart 8
1 取出MagET™ DNA回收预分装试剂条,颠倒混匀数次使磁珠重悬,轻甩MagET™ DNA回收预分装试剂条使试剂及磁珠均集中到试剂 条底部。
注:使用前小心撕去铝箔封口膜,避免MagET™ DNA回收预分装试剂条振动,防止液体溅出。
2 在MagET™ DNA回收预分装试剂条的第 2 孔中加入切下的琼脂糖凝胶块,将MagET™ DNA回收预分装试剂条置于 MagET™ Smart 8的试剂盒支架上。
注:请在加样后1 h内上机运行程序。
3 用移液器准确吸取 100 μl洗脱液,加入到MagET™ 洗脱管中,将MagET™ 洗脱管置于 MagET™ Smart 8的试剂盒支架上,将试剂盒 支架安装于 MagET™ Smart 8设备底座上。
4 将MagET™ 4孔磁棒套插入 MagET™ Smart 8 磁棒套架卡槽内。
5 选择程序并运行,自动化程序结束后,取下MagET™ 4孔磁棒套丢弃,拿出试剂盒支架,取下MagET™ 洗脱管,盖上管盖,即得回收的 DNA 产物。如不能及时进行下游试验,DNA 样本可短期保存于 -20℃。
表1.MagETTM Smart 8 程序设定
流程 | 工作孔位 | 名称 | 时长 | 幅度 | 频率 | 磁吸时间 | 转移等待 | 温度 |
1 | 1 | 取磁珠 | 1min | 最大 | 最快 | 60s | 0 | - |
2 | 2 | 结合 | 10min | 较大 | 较快 | 90s | 0 | 80°C |
3 | 3 | 洗杂 | 1min | 较大 | 较快 | 60s | 0 | - |
4 | 4 | 洗杂 | 1min | 较大 | 较快 | 60s | 120s | - |
5 | 6 | 洗脱 | 5min | 较大 | 较快 | 90s | 0 | - |
6 | 1 | 弃磁珠 | 1min | 最大 | 最快 | 0 | 0 | - |