<BK0014> ACE 磁珠法质粒DNA小量提取试剂盒(单条孔)

栏目:核酸提取纯化
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磁珠法质粒DNA抽提试剂盒采用经典的SDS碱裂解法充分裂解释放质粒,再通过醇介导将质粒结合于纳米磁珠表面,经洗液洗去蛋白等杂质,最后洗脱得到高纯的质粒产物。产物可用于酶切、转化、PCR、测序等分子生物学实验。


磁珠法质粒DNA小量提取试剂盒(单条孔)

产品线

产品目录名称

规格

货号

目录价

核酸提取纯化

磁珠法质粒DNA小量提取试剂盒(单条孔)

48 T

BK0014-01

143


产品介绍 

磁珠法质粒DNA抽提试剂盒采用经典的SDS碱裂解法充分裂解释放质粒,再通过醇介导将质粒结合于纳米磁珠表面,经洗液洗去蛋白等杂质, 最后洗脱得到高纯的质粒产物。产物可用于酶切、转化、PCR、测序等分子生物学实验。

试剂名称

48 T

溶液 P1

5 ml

溶液 P2

5 ml

溶液 P3

5 ml

RNase (20 mg/ml)

500 μl

MagET™ 质粒DNA预分装试剂条

16*3

洗脱液

5 ml

MagET™ 洗脱管

48

MagET™ 4孔磁棒套

2*6


注意事项 

1 使用前检查各组分是否出现沉淀。若有,请轻轻摇晃混合均匀,或37℃水浴重新溶解。 

2 使用前请将RNase(20mg/ml)全部加入溶液 P1 中,用完置于4℃保存。


使用流程 

样本预处理 

1 取1-5ml 细菌培养物,加入离心管中,使用常规台式离心机12,000rpm(~13,400×g)离心1-5 min ,尽量吸尽上清。(菌液较多时可以通 过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。 

2 向留有菌体沉淀的离心管中加入100 μl 溶液 P1(请先检查是否加入RNase),使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀。注意:如果 菌体未彻底混匀,质粒提取量和纯度会偏低。 

3 向离心管中加入100 μl 溶液 P2,温和的上下翻转6-8次使菌体充分裂解,室温静置1~ 5 min(时间不宜过长),以免质粒DNA受到破坏 。 

4 向离心管中加入100 μl 溶液 P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。12,000rpm(~13,400×g)离心 5min,小心吸取全部上清,备用。

自动化法提取 -MagET™ Smart 8 

1 取出MagET™ 质粒DNA预分装试剂条,颠倒混匀数次使磁珠重悬,轻甩MagET™ 质粒DNA预分装试剂条使试剂及磁珠均集中到试剂 条底部。

注:使用前小心撕去铝箔封口膜,避免MagET™ 质粒DNA预分装试剂条振动,防止液体溅出。 

2 在MagET™ 质粒DNA预分装试剂条的第 2 孔中加入 3.1.4 中预处理后的全部上清液,将MagET™ 质粒DNA预分装试剂条置于 MagET™ Smart 8的试剂盒支架上。

注:请在加样后1h内上机运行程序。 

3 用移液器准确吸取 100 μl洗脱液,加入到MagET™ 洗脱管中,将MagET™ 洗脱管置于于 MagET™ Smart 8的试剂盒支架上,将试剂盒支架安装于 MagET™ Smart 8设备底座上。

4 将MagET™ 4孔磁棒套插入 MagET™ Smart 8 磁棒套架卡槽内。

5 选择程序并运行,自动化程序结束后,取下MagET™ 4孔磁棒套丢弃,拿出试剂盒支架,取下MagET™ 洗脱管,盖上管盖,即得质粒 DNA 产物。如不能及时进行下游试验,质粒DNA 样本可短期保存于 -20℃。

表1. MagET™ Smart 8 程序设定

流程

工作孔位

名称

时长

幅度

频率

磁吸时间

转移等待

温度

加热时间

1

1

取磁珠

1min

最大

最快

60s

0

-

0

2

2

结合

5min

较大

较快

90s

0

-

0

3

3

洗杂

1min

较大

较快

60s

0

-

0

4

4

洗杂

1min

较大

较快

60s

120s

-

0

5

6

洗脱

5min

较大

较快

90s

0

-

0

6

1

弃磁珠

1min

最大

最快

0

0

-

0