广谱型磷酸酶抑制剂混合物(100x储液)
General Phosphatase Inhibitor Cocktail (100xStock Solution)
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 | 价格 |
NBS8061-1ml | General Phosphatase Inhibitor Cocktail (100xStock Solution) 广谱型磷酸酶抑制剂混合物(100x储液) | 1ml | 475 |
产品简介:
细胞内蛋白的磷酸化和去磷酸化是信号转导、细胞增殖、分化和凋亡等重要生理活动的调控开关,这两种作用主要通过蛋白激酶和磷酸酶的相互协调来实现。体外研究中,由于组织或者细胞经裂解会释放出大量的酶原,这些酶原会被激活从而开始消化随之释放的待研究蛋白,不仅影响对蛋白真实水平的了解,甚至由于某些蛋白含量很低,再经进一步降解,无法检测到,干扰对调控机制的正确研究。为此,体外研究,最大限度还原蛋白在细胞内的原始状态极其重要,可通过蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的组合使用来达此目的。
本品是多种磷酸酶抑制剂的特殊混合物,包含氟化钠,正钒酸钠,咪唑,钼酸钠,酒石酸钠,焦磷酸钠,β-磷酸甘油等成分,广谱抑制非特异性的酸性和碱性磷酸酶,以及特异性的酪氨酸磷酸酶,丝氨酸和苏氨酸蛋白磷酸酶等。
本品以100×储存液的形式提供,可用来保护来源于原代细胞、哺乳动物细胞、动植物、细菌、酵母等组织或细胞等裂解物中的多种磷酸化蛋白维持本来状态,适用于蛋白纯化,蛋白免疫印迹(Western Blot),免疫(共)沉淀(IP/Co-IP),蛋白下拉(Pull-down assay),免疫荧光(IF),免疫组化(IHC),以及激酶研究等多种实验。
保存条件:
-20℃保存,1年稳定。
产品成分:
抑制剂名称 | 抑制靶点 |
Imidazole咪唑 | 蛋白组氨酸磷酸酶(protein histidine phosphatase, PHP) |
Sodium Fluoride 氟化钠 | 蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶(protein serine/threonine phosphatase, PSP) 酸性磷酸酶(acid phosphatase) |
Sodium Orthovanadate 正钒酸钠 | 蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatase, PTP),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase) |
Sodium Molybdate 钼酸钠 | 酸性磷酸酶(acid phosphatase) |
Sodium Tartrate 酒石酸钠 | 酸性磷酸酶(acid phosphatase) |
Sodium Pyrophosphate 焦磷酸钠 | 蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶(protein serine/threonine phosphatase,PSP) |
β-Glycerophosphate β-磷酸甘油 | 蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶(protein serine/threonine phosphatase,PSP) |
产品使用:
1)使用前室温平衡直至完全溶解,低速震荡以保证各成分均匀。
2)按照1:100的比例(体积比)加入样品溶液(比如细胞或组织裂解液)中即可。或者根据实验目的,以及所研究的特定细胞和组织,通过实验进行使用比例的摸索和优化。
注意事项:
1. DTT、EDTA和EGTA对正钒酸钠活性的发挥会有影响。
2. 本品具广谱磷酸酶抑制活性,不具有蛋白酶抑制活性。可配合蛋白酶抑制剂Cocktail (无EDTA, 100×溶于DMSO)(货号:NBS0001-1ml)一起使用以实现蛋白的全面保护。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂:
名称 | 货号 | 抑制 类型 | 作用位点 | 溶解性 | 工作浓度 |
可逆 | 丝氨酸蛋白酶 | 甲醇、异丙醇 | 0.1~1mM | ||
可逆 | 金属蛋白酶 | 水 | 2~10mM | ||
不可逆 | 丝氨酸蛋白酶 | 水 | 0.1~1mM | ||
可逆 | 丝氨酸蛋白酶 | 水 | 100~200nM | ||
可逆 | 丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶 | 水 | 10~100μM | ||
可逆 | 天冬氨酸蛋白酶 | 甲醇 | 1~20μM | ||
不可逆 | 半胱氨酸蛋白酶 | 乙醇:水(1:1) | 1~20 μM | ||
可逆 | 氨肽酶 | 甲醇 | 1~10μM | ||
不可逆 | 酪氨酸和碱性磷酸酶 | 水 | 1~100mM | ||
不可逆 | 丝/苏氨酸和酸性磷酸酶 | 水 | 1~20mM |