FM 4-64 (N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(Diethylamino) Phenyl) Hexatrienyl) Pyridinium Dibromide) 

神经末梢荧光探针

产品简介：

FM 4-64，英文全名：N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(Diethylamino) Phenyl) Hexatrienyl) Pyridinium Dibromide，是一种亲脂的苯乙烯染料，用作一种活细胞探针示踪酵母整体膜内在化和运输到液泡。FM 4-64是一种灵敏的液泡动力学分析探针，检测一系列相关事件，包括有丝分裂中的分离结构形成、液泡分裂和融合事件，以及液泡蛋白质分拣蛋白突变体在不同阶段的液泡形态。

FM 4-64具水溶性、对细胞无毒性，在水溶液中基本无荧光，一旦插入脂膜表面发出强的红色荧光。FM 4-64与呈绿色荧光的FM1-43（货号：NBS3210）在合适的滤片能够区分开，允许双色实时观察膜的再循环。

产品特性：

1） 同义名：N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(diethylamino)phenyl)hexatrienyl)pyridinium dibromide

2） 分子式：C30H45Br2N3

3） 分子量：607.51

4） 纯度：≥90%（HPLC）

5） 外观：紫色固体 

6） 溶解性：溶于水、DMSO

7） Ex/Em：558/734nm

8） 溶解性：溶于水

9）化学结构图：

保存条件: 

-20°C避光干燥保存，至少1年有效。

产品使用：

1. 储存液配制

于实验前，将冻干粉置于室温回温至少20min，加入无菌水或DMSO配制成10mM或其他浓度储存液，比如，对于1mg FM 4-64（MW: 607.51）加入164μl DMSO,充分溶解后即得到10mM储存液，根据单次用量分装，≤-20℃冻存，避免反复冻融。

2. 染色方法（仅作参考）

【注意】：a）以下以爬片生长的贴壁活细胞的质膜染色为例，仅作参考。最佳的染色条件根据使用细胞特征进行调整。

b）由于FM 4-64快速被内吞，很有必要参考下方的温度和时间指导来减慢内吞，提高质膜的选择性标记和成像。内吞很可能在染色的10min内发生。

c）以下步骤推荐使用不含钙镁的HBSS。钙镁的存在明显会加速染料内吞，导致质膜选择性染色很弱。

2.1用提前冰浴的HBSS缓冲液来稀释储存液到所需的工作浓度比如8μM。

2.2将盖玻片从培养基内取出，快速的浸入含足量FM 4-64的染色工作液，冰上孵育1min。质膜能被快速染色。

2.3将盖玻片从染色工作液中取出，置于载玻片上封片，周围用石蜡密封，置于冰上，立即成像。

注意事项：

1.      荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。

2.      FM^®是Molecular Probe公司的注册商标。

3.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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