Magneti-G Control IgG Beads

产品介绍 

Magneti-G Control IgG Beads含有和Magneti-G标签抗体磁珠相同的IgG亚型，由高质量的IgG和纳米级磁珠偶联而成，可用作免疫沉淀(IP)、免疫 共沉淀(Co-IP)等抗体相关实验时Magneti-G标签抗体磁珠的对照磁珠（阴性对照）。

磁珠性质 

高聚物磁珠采用高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料完美地结合在一起，具有更快的磁响应性同时保持微球良好的分散性、极低的非特异性 吸附和更丰富的结合位点。磁珠具体性能见表1。 

表1：Magneti-G Control IgGBeads产品性能

使用方法 

本操作流程和Magneti-G标签抗体磁珠操作流程完全一样，每次反应使用20μl Magneti-G Control IgG Beads。

1 推荐缓冲液（自备）

表2：缓冲液配置

2 磁珠漂洗 

1）将磁珠充分混匀后取20ul磁珠置于离心管中，向管中加入500ul洗杂缓冲液，上下颠倒混匀5-10次。 

2）将离心管置于磁力架上，待磁珠全部吸附后，吸弃上清。 

3）向管中加入500ul洗杂缓冲液，上下颠倒混匀5-10次，将离心管置于磁力架上，待磁珠全部吸附后，吸弃上清。 

4）重复操作3次。

3 样品孵育

1）向上述漂洗好的磁珠中加入500-1000ul的细胞裂解样品，常温或4℃下孵育60min（建议在旋转混匀仪上孵育，使样品和磁珠充分接触）。 

2）孵育结束后，将离心管置于磁力架上，待磁珠全部吸附后，将上清转移至新的离心管中，留样备检。 

3）向离心管中加入500ul 洗杂缓冲液，轻轻颠倒混匀5-10次后将离心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后弃去上清。 

4）重复操作5次。 

注：孵育温度和时间范围推荐为：室温0.5h-2h或者4℃、1h-4h，根据实际的结合效果适当调整孵育时间，一般情况下不建议过夜孵育，过夜孵育 可能会引起过多的非特异性吸附。磁珠每次洗涤，加入洗杂缓冲液后可以冰上静置3-5分钟。

4 蛋白洗脱 

1) 洗脱液洗脱 

每20ul原始磁珠体积加入40ul洗脱液，常温或4℃洗脱5-10min，期间轻轻混匀3-5次。孵育结束后将离心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后， 吸取上清至新的离心管中，加入少量的中和缓冲液将pH调至中性，最后进行Western检测。 

2) SDS-PAGE上样缓冲液洗脱 

每20ul原始磁珠体积加入60ul的1×SDS Loading Buffer，轻摇摇晃混匀后95-100℃高温处理5-10min。将离心管置于磁力架上分离10s，取上清 进行SDS-PAGE电泳或进行Western检测。

注意事项 

1) 本产品保存在2-8℃，不可冻结保存； 

2) 本产品出现轻微团聚属正常现象，可正常使用； 

3) 本产品不要使用含有DTT等还原剂的细胞裂解液样品，DTT可能会导致抗体配体的脱落； 

4) 本产品能耐受≤2M尿素，高浓度的尿素会导致抗体配体脱落； 

5) 在清洗和洗脱时避免吸取到磁珠，清洗时吸取到磁珠会影响最终的载量，洗脱时吸取到磁珠会影响目的蛋白的质量和电泳效果，第一次洗脱后可 以将洗脱液置于新的离心管中，再次置于磁力架上进行吸附。