<BK0045> ACE 染色质免疫共沉淀(CHIP)试剂盒

栏目:免疫沉淀及免疫共沉淀
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染色质免疫共沉淀试剂盒,也称ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)试剂盒,是ChIP相关实验流程中最重要的一环。ChIP是在活细胞状态下, 通过甲醛固定使蛋白质与DNA形成复合物,并通过超声的方法将其随机切断成一定长度范围内的染色质小片段,然后再通过抗原抗体特异性结合反 应,富集与目的蛋白结合的DNA片段,解交联后分离、纯化DNA,获取的DNA经检测分析,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。 该试剂盒包含含BoxA、BoxB和BoxC,可进行24次独立的染色质免疫沉淀(ChIP)反应。经验证,试剂盒中提供的rProtein A/G MagPoly Beads, 能更好的免疫沉淀染色质。在蛋白质-DNA解交联后,DNA使用离心柱法进行纯化,方便快捷,无需进行苯酚/氯仿提取和乙醇沉淀。目的DNA序列 的富集可通过标准PCR、qPCR或测序等各种方法进行分析。


染色质免疫共沉淀(CHIP)试剂盒

产品线

产品目录名称

规格

货号

目录价

分子互作

染色质免疫共沉淀(CHIP)试剂盒

24 T

BK0045-01

4000


产品介绍 

染色质免疫共沉淀试剂盒,也称ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)试剂盒,是ChIP相关实验流程中最重要的一环。ChIP是在活细胞状态下, 通过甲醛固定使蛋白质与DNA形成复合物,并通过超声的方法将其随机切断成一定长度范围内的染色质小片段,然后再通过抗原抗体特异性结合反 应,富集与目的蛋白结合的DNA片段,解交联后分离、纯化DNA,获取的DNA经检测分析,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。 该试剂盒包含含BoxA、BoxB和BoxC,可进行24次独立的染色质免疫沉淀(ChIP)反应。经验证,试剂盒中提供的rProtein A/G MagPoly Beads, 能更好的免疫沉淀染色质。在蛋白质-DNA解交联后,DNA使用离心柱法进行纯化,方便快捷,无需进行苯酚/氯仿提取和乙醇沉淀。目的DNA序列 的富集可通过标准PCR、qPCR或测序等各种方法进行分析。

表1.ChromatinImmunoprecipitation(ChIP)Kit产品组分

产品序号

产品名称

规格(8T)

规格(24T)

保存温度

BOX A

1

rProteinA/G MagPoly Beads

0.3 mL

1 mL

2–8°C

2

Glycine Solution (2.5M)

8 mL

12.5 mL × 2

3

ChIP Sonication Buffer

8 mL

25 mL

4

ChIP Buffer

3 mL

10 mL

5

High Salt and Lysis Buffer

17.5 mL × 2

100 mL

6

Low Salt Buffer

20 mL

60 mL

7

TE Buffer

8 mL

25 mL

BOX B

8

DNA BL Buffer

5 mL

15 mL

RT

9

DNA Binding Buffer

5 mL

15 mL

10

DNA Wash Buffer

15 mL

40 mL

11

DNA Elution Buffer

1 mL

1 mL

12

RNase free ddH₂O

1 mL

1 mL

13

Purification Column

10 个

30 个

14

Collection Tube

10 个

30 个

BOX C

15

Protease inhibitors (100×)

0.3 mL

1 mL

-20°C

16

Proteinase K (10 mg/mL)

70 μL

200 μL

17

RNase (10 mg/mL)

70 μL

200 μL


实验准备及注意事项

1 试剂的准备

1×PBS 

37%甲醛(分子级别) 

1.5%琼脂糖凝胶 

ChIP级目的抗体 

与目的抗体同种属IgG对照抗体 

用于PCR或qPCR检测试剂盒

2 设备及耗材的准备

磁力架 

超声波细胞破碎仪

涡旋振荡器 

微量离心机 

水浴锅 

计时器 

可变容量移液器(10μL-1000μL)+相关吸头 

1.5mL无RNase微量离心管 

15mL无RNase离心管 

PCR仪 

PCR管

3 注意事项 

1) 试剂盒采用冰袋运输,收货后,取出BoxA置于2-8℃,BoxB置于室温,BoxC置于-20℃保存,避免阳光直射。 

2) Protease inhibitors 为一种细胞毒性化学物质,建议在通风橱或经认证的生物实验台中使用,且注意避光保存。


操作步骤

具体操作步骤请参考说明书