染色质免疫共沉淀(CHIP)试剂盒
产品线 | 产品目录名称 | 规格 | 货号 | 目录价 |
分子互作 | 染色质免疫共沉淀(CHIP)试剂盒 | 24 T | BK0045-01 | 4000 |
产品介绍
染色质免疫共沉淀试剂盒,也称ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)试剂盒,是ChIP相关实验流程中最重要的一环。ChIP是在活细胞状态下, 通过甲醛固定使蛋白质与DNA形成复合物,并通过超声的方法将其随机切断成一定长度范围内的染色质小片段,然后再通过抗原抗体特异性结合反 应,富集与目的蛋白结合的DNA片段,解交联后分离、纯化DNA,获取的DNA经检测分析,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。 该试剂盒包含含BoxA、BoxB和BoxC,可进行24次独立的染色质免疫沉淀(ChIP)反应。经验证,试剂盒中提供的rProtein A/G MagPoly Beads, 能更好的免疫沉淀染色质。在蛋白质-DNA解交联后,DNA使用离心柱法进行纯化,方便快捷,无需进行苯酚/氯仿提取和乙醇沉淀。目的DNA序列 的富集可通过标准PCR、qPCR或测序等各种方法进行分析。
表1.ChromatinImmunoprecipitation(ChIP)Kit产品组分
产品序号 | 产品名称 | 规格(8T) | 规格(24T) | 保存温度 | |
BOX A | 1 | rProteinA/G MagPoly Beads | 0.3 mL | 1 mL | 2–8°C |
2 | Glycine Solution (2.5M) | 8 mL | 12.5 mL × 2 | ||
3 | ChIP Sonication Buffer | 8 mL | 25 mL | ||
4 | ChIP Buffer | 3 mL | 10 mL | ||
5 | High Salt and Lysis Buffer | 17.5 mL × 2 | 100 mL | ||
6 | Low Salt Buffer | 20 mL | 60 mL | ||
7 | TE Buffer | 8 mL | 25 mL | ||
BOX B | 8 | DNA BL Buffer | 5 mL | 15 mL | RT |
9 | DNA Binding Buffer | 5 mL | 15 mL | ||
10 | DNA Wash Buffer | 15 mL | 40 mL | ||
11 | DNA Elution Buffer | 1 mL | 1 mL | ||
12 | RNase free ddH₂O | 1 mL | 1 mL | ||
13 | Purification Column | 10 个 | 30 个 | ||
14 | Collection Tube | 10 个 | 30 个 | ||
BOX C | 15 | Protease inhibitors (100×) | 0.3 mL | 1 mL | -20°C |
16 | Proteinase K (10 mg/mL) | 70 μL | 200 μL | ||
17 | RNase (10 mg/mL) | 70 μL | 200 μL | ||
实验准备及注意事项
1 试剂的准备
1×PBS
37%甲醛(分子级别)
1.5%琼脂糖凝胶
ChIP级目的抗体
与目的抗体同种属IgG对照抗体
用于PCR或qPCR检测试剂盒
2 设备及耗材的准备
磁力架
超声波细胞破碎仪
涡旋振荡器
微量离心机
水浴锅
计时器
可变容量移液器(10μL-1000μL)+相关吸头
1.5mL无RNase微量离心管
15mL无RNase离心管
PCR仪
PCR管
3 注意事项
1) 试剂盒采用冰袋运输,收货后,取出BoxA置于2-8℃,BoxB置于室温,BoxC置于-20℃保存,避免阳光直射。
2) Protease inhibitors 为一种细胞毒性化学物质,建议在通风橱或经认证的生物实验台中使用,且注意避光保存。
操作步骤
具体操作步骤请参考说明书