Anti DYKDDDDK（FLAG） Antibody-HRP抗体

产品介绍
DYKDDDDK肽段是融合蛋白表达纯化过程中最常用的标签(tag)之一，DYKDDDDK 肽段也经常被称为 Flag肽段，是 Sigma公司的注册商标。它可以连接在融合蛋白的 N 端、C端或序列中间，具有极好的亲水性，更容易展示在融合蛋白的表面，干扰融合蛋白功能的可能性较小。这一标签还具有一个优势：连接在目的蛋白N端时，可以被 Enterokinase(EKprotease)从序列C端赖氨酸的位置切除，而不留下冗余残基。抗 DYKDDDDK 标签的抗体能对 DYKDDDDK 标签融合蛋白进行准确的检测和纯化，通过一定的工艺将辣根过氧化物酶 (HRP)偶联至DYKDDDDK标签抗体上，进行 WB 实验时加入发光液 A和 B，一般是鲁米诺和过氧化氢，在辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用下，鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物，过氧化物不稳定随即分解，形成一种能发光的电子激发中间体，当后者由激发态返回至基态，就会产生荧光，实现对 DYKDDDDDK 标签融合蛋白快速检测。
基本信息如下：
抗体来源:重组抗体
交叉反应:DYKDDDDK标签融合蛋白
克隆类型:单克隆抗体
偶联物:辣根过氧化物酶 (HRP)
纯化方式:rProtein A 亲和纯化
储存缓冲液:1xPBS(pH7.4),0.05% proclin300,50% 甘油

产品应用
WB=1:30000-1:100000
ELISA=1:5000-1:10000

储存条件

干冰运输，-20°C可保存2年,避免反复冻融

注意事项
1) 本产品为 HRP 直标抗体,需要避光保存于 -20°C或者 -80°C中;
2) 本产品灵敏度高,WB 稀释比值请按照说明书进行,否则可能会出现非特异性条带;
3) NC 膜或者 PVDF 膜在转膜前需要用甲醇激活,转膜后抗体稀释液尽量过量,转膜和抗体孵育过程中不要产生气泡:
4) 本品在 37°℃下孵育 30min-60min 即可产生很明显的信号,常温孵育可适当延长时间。

参考信息 

1) 表达系统：293细胞分泌表达; 

2) 蛋白信息：带有DYKDDDDDK标签的重组蛋白，大小≈25KDa； 

3) 上样顺序：1为10ng纯化后的目的蛋白，2为50ng纯化后的目的蛋白，3为牛血清白蛋白(BSA)； 

4) 抗体稀释液体积：10ml； 

5) 抗体孵育条件：37℃摇晃孵育30min; 

6) 显色：ECL进行显色; 

7) 结论：Anti DYKDDDDK Antibody-HRP 按照 1:10000，1:30000和1:100000稀释后（抗体稀释体积10ml）37℃摇晃孵育30min，能 够看到很明显的信号，目的条带位置在25KDa，在50-55KDa处有较弱的聚体条带，随着稀释比值的增大，信号值会有下降，我们推荐客户使 用1:30000 的梯度进行抗体稀释。