植物囊泡/外泌体提取指南

前言：

植物细胞外囊泡(PENs)，特别是具有药用价值的植物，中医上有天然的性味归经具有靶向性药物递送潜力。但植物种类繁多、内含多种杂质、比较有提取难度，比如葛根、山药、石斛等。

该指南将常见功效性植物按照“果实、花/叶、根茎、干品植物(花、根茎、种子)"进行分类，并加入大型真菌，分为五大类详细介绍前处理细节及产品推荐，特为有植物囊泡/外泌体提取和研究需求的客户提供稳定实用的前处理建议。

出汁率(每千克原料出汁量)=汁液体积(mL)/原材料质量(kg)

样本前处理指南：

1. 果实：如柠檬等。

1)     尽量选择新鲜果实，避开干瘪、发霉的果实，干果或果脯;

2)     出汁率：300~400mL/kg;

3)     推荐榨汁机：手摇式碾磨榨汁机;

4)     果实质量参考：70g左右果实(不包括果皮)，榨汁处理后得到20~30mL原汁，按推荐试剂盒进行前处理后，浓缩50倍，最终可获得400μL左右的植物囊泡。

5)     处理：

薄皮果实洗净后，将果实切小块直接榨汁;

厚皮果实(如柠檬)的果皮出汁量较低且含有大量杂质，需要去皮后切小块再榨汁。

6)     提取试剂盒推荐：货号：NW3225 植物囊泡提取纯化试剂盒（多汁植物）。

2. 花/叶：如玫瑰、芦荟等。

1)     尽量选择新鲜花/叶

2)     出汁率：200~300mL/kg;

3)     推荐榨汁机：电动碾磨榨汁机;

4)     花/叶质量参考：100g左右花叶(只包含待提取部位质量，如花瓣、植物叶等)，榨汁处理后得到20~30mL汁液，按推荐试剂盒进行前处理后，浓缩50倍，得到400μl左右植物囊泡。

5)     处理：

花需要去除花托、花萼和花蕊，只保留待提取部位的花瓣;

植物叶需要去除蔫掉的叶片和植物的茎，只保留待提取部位的植物叶。

6)     提取试剂盒推荐：货号：NW3225 植物囊泡提取纯化试剂盒（多汁植物）。

3. 根茎：如葛根、三七、麦冬等。

1)     尽量选择新鲜现挖后直接邮寄的植物根茎，尽量避开干品；如需选择汁液黏稠的根茎(如山药、石斛等)，须严格参照推荐的试剂盒说明书进行；

2)     出汁率:150~200mL/kg；

注：汁液黏稠的植物根茎由于榨汁过程中可能会加入PBS，所以植物汁液量不完全来自植物组织本身，但仍可按照推荐的质量提取，若榨汁后汁液流动性差，可用适量PBS辅助溶解后合并处理。

3)     推荐榨汁机：电动碾磨榨汁机；

4)     根茎质量参考：150g左右根茎，榨汁处理后得到20~30mL汁液，按推荐试剂盒进行前处理后，浓缩50倍，得到400μL左右植物囊泡。

5)     处理：

硬皮的植物根茎(如葛根)需要洗净、削去硬的外皮后，将根茎尽可能切小块或削成小片，少量多次地投入榨汁机榨汁;

薄皮的植物根茎(如麦冬)可以洗净外皮泥土后，直接切小块榨汁。

6)     提取试剂盒推荐：按照植物出汁后的汁液状态选择对应的试剂盒;

货号：NW3225 植物囊泡提取纯化试剂盒（多汁植物）。

货号：NW3226 植物囊泡提取纯化试剂盒（粘稠汁液植物）。

4. 干品植物：包含无法鲜提的花、根茎、种子，如金银花、红景天、火麻仁等。

1)     尽量选择可以直接泡发，不需要二次处理的干品植物；以火麻仁为例，优先选择去壳的火麻仁种子;

2)     推荐榨汁机：旋转刀片榨汁机；

3)     干品植物质量参考：10g左右干品，用PBS泡发后，加泡发水20~30mL榨汁，收集汁液按推荐试剂盒进行前处理后，浓缩50倍，得到400μl左右植物囊泡。

4)     处理：

干品植物如果呈大块片状，需要先撕成小块或剪成小块后再进行泡发;

干品植物的PBS量加到没过干品即可，泡发时间视植物泡发状态而定。

5)     提取试剂盒推荐：货号：NW3227 植物囊泡提取纯化试剂盒（干品植物）。

5. 其他大型真菌：如灵芝等。

1)     尽量选择新鲜的待提取真菌；

2)     推荐榨汁机：电动碾磨榨汁机;

3)     大型真菌质量参考：20g左右大型真菌，榨汁打碎后取碎渣，加40~50mL PBS后，再按推荐试剂盒处理后浓缩100倍，得到400μl左右植物囊泡。

4)     处理：

大型真菌需要洗净后尽可能切小片榨汁；

大型真菌榨汁后几乎不产生汁液，需要通过榨汁步骤将真菌组织磨碎后，在磨碎的组织中加PBS再进行后续处理。

5)     提取试剂盒推荐：货号：NW3228 大型真菌囊泡提取纯化试剂盒。

部分数据展示：

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本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！