D 型多聚赖氨酸(PDL)溶液(5 mg/mL)
Poly-D-lysine Solution (5 mg/mL)
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
NBS6014-400μL | D 型多聚赖氨酸(PDL)溶液(5 mg/mL) | 400μL |
产品简介:
多聚赖氨酸(poly-lysine)是一类带正电的氨基酸聚合物,可与 DNA、红细胞膜以及各类带负电蛋白结合,属于非特异性细胞粘附因子,能够促进细胞吸附于固相基质表面。其作用机制为增强细胞膜表面负电荷与培养皿、载玻片等固相基质之间的静电相互作用;当吸附于基底表面后,多聚赖氨酸可增加供细胞结合的阳离子结合位点数量。
多聚赖氨酸的粘度与分子量直接相关:分子量越低,粘度越小,操作更简便;分子量越高,粘度越大,可提供的粘附位点也更多。分子量>30,000 的多聚赖氨酸,适合用于介导细胞粘附于固相基质。
多聚赖氨酸主要存在 D 型和 L 型两种异构体。二者均为非特异性粘附介质,均可包被固相基底,在细胞培养中助力细胞贴壁。文献报道,多聚 L - 赖氨酸可提升蛋白在 ELISA 板上的吸附能力;但在部分细胞实验中,细胞可水解多聚 L - 赖氨酸。该场景下需选用多聚 D - 赖氨酸作为粘附基质,避免细胞因摄入过量 L - 赖氨酸而受损。
本品为无菌 Poly-D-lysine(D 型多聚赖氨酸)溶液,浓度 5 mg/mL,分子量 150,000–300,000,经稀释后可直接应用于细胞与组织培养相关实验。
保存条件:
-20℃保存(一年有效)
产品使用:
1. 细胞培养用包被基质
采用 D 型多聚赖氨酸开展细胞包被实验时,需根据不同细胞系与实验用途优化包被条件,常规操作步骤如下:
1) 取 5 mg/mL D 型多聚赖氨酸(PDL)溶液,用无菌组织培养用水或 PBS 稀释至适配本实验体系的包被浓度。细胞培养皿 / 板常规包被浓度为 0.1 mg/mL,即储存液稀释 50 倍使用。
2) 在无菌环境下包被培养板,用量为 0.5–1.0 mL / 25 cm²;轻轻晃动培养板,使溶液均匀覆盖整个底面。
3) 孵育 5 min 后,吸去板内溶液,采用无菌组织培养用水或 PBS 清洗板面。
注:部分实验体系需要包被孵育 1–2 h,也有方案选择过夜包被,需根据实验需求确定。
4) 至少干燥 2 h 后,方可接种细胞进行培养。
注:若包被后表面不均一,可采用两种预处理方案:①玻璃载玻片经 1 mM 醋酸镁预处理 2–3 h,充分洗净后再包被;②玻璃载玻片采用酸洗液(盐酸或硫酸体系)清洗,该处理可使 Poly-D-lysine 包被层更加平整。
2. 组织学研究(玻片包被)
1) 取 5 mg/mL D 型多聚赖氨酸(PDL)溶液,用无菌组织培养用水或 PBS 稀释至适配浓度;组织学玻片制备一般推荐使用 0.1% (w/v) Poly-D-lysine 工作液。
2) 将玻片置于上述工作液中处理 5 min,清洗后室温过夜干燥,或置于约 60 ℃烘箱中烘干约 1 h。
注:该工作液可置于塑料瓶中 4 ℃保存,建议重复使用不超过 4 次。
注意事项:
1. 经多聚赖氨酸包被的玻璃器皿、玻片如需除菌,建议采用 γ 射线辐照,不可高压蒸汽灭菌。
2. 在部分细胞培养场景下,细胞可降解多聚 L - 赖氨酸,并摄取释放出的 L - 赖氨酸单体;过量摄取 L - 赖氨酸会引发细胞毒性。因此该类实验推荐选用 D 型多聚赖氨酸(Poly-D-lysine)。
3. 本品以氢溴酸盐形式提供,每个赖氨酸残基结合一分子氢溴酸盐。氢溴酸盐结构使多聚赖氨酸可溶于中性缓冲液,可通过透析去除其中盐离子。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!