5-FAM SE (5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester)

5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯

产品简介：

5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester,5-FAM SE）是5/6-FAM SE（FITC-NHS）的单一纯化异构体，是5-FAM的胺反应性琥珀酰亚胺酯。是最受欢迎的绿色荧光染料之一，用于多肽、蛋白和核苷酸的标记，也能用于制备各种小荧光分子。

产品特性：

1） CAS NO.：92557-80-7

2） 同义名：5-FAM, SE;5-FAM,NHS ester;5-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester;5-Carboxyfluorescein NHS ester;5-Carboxyfluorescein, succinimidyl ester; 5-羧基荧光素N -羟基琥珀酰亚胺酯；5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯；

3） 分子式：C₂₅H₁₅NO₉

4） 分子量：473.39

5） 荧光：λex 492 nm; λem 517 nm in DMF

6） 外观：粉末

7） 溶解性：溶于DMSO、DMF

8） 纯度：≥95%

保存条件: 

-20℃避光干燥保存，2年有效。 

注意事项：

1.       5-FAM SE对湿度敏感。为了避免产品受潮，务必在开盖前将低温保存的产品从冰箱取出，平衡至室温至少30min再使用。

2.      荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

3.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

SE化合物生物标记的几个考虑因素：

1） 溶剂

大多数情况下，SE化合物（反应性染料）都是疏水性分子，需用无水DMF或DMSO作为溶剂。比如：5-FAM SE（Mw：473.39）需先溶于高质量无水DMSO配制成≥1mg/ml的母液，之后加入反应缓冲液中进行标记实验。强烈推荐新鲜配制母液和工作液，如果非要保存母液的话，请务必根据单次用量分装，≤-20℃避光密封干燥保存，尽量在1个月内用完。

2） 反应pH

SE与胺的标记反应具非常强的pH依赖性。胺反应化合物与非质子化的脂肪胺反应，包括：蛋白的末端胺，赖氨酸的ε-氨基。氨酰化通常在pH 7.5以上进行。通过SE基团的蛋白修饰通常在pH 7.5-8.5之间进行，而异硫氰酸基团需在pH 9.0-10.0之间才能获得最佳的标记效果。

3） 反应缓冲液

缓冲液含游离胺（比如：Tris、甘氨酸和巯基化合物）必须避免，因为这些也是胺反应试剂。铵盐（硫酸铵或醋酸铵）普遍用于蛋白沉淀中，必须在进行染料标记之前去除。

比如：5-FAM SE进行蛋白标记，可选择50mM硼酸钠缓冲液（pH 8.5）作为反应缓冲液。

4） 反应温度

大部分标记反应在室温进行，然而，对于某些特殊的标记反应可能需提高或降低温度。