<NBH1052> 单克隆挑取专用双通管 （克隆环），高10mm内径5mm壁厚1mm，无菌
<NBH1052> 单克隆挑取专用双通管 （克隆环），高10mm内径5mm壁厚1mm，无菌
货号：NBH1052
规格：100个/包
品牌：NoninBio
单克隆挑取专用双通管 （克隆环）
高10mm*内径5mm*壁厚1mm，无菌
产品简介：
玻璃克隆环由石英玻璃制造，壁厚1mm，克隆环是筛选单克隆细胞的一个简单易行的方法，用克隆环可以有效的从培养板或者培养皿等培养耗材获得单克隆细胞。在使用时，首先将克隆环灭菌，用无菌硅脂实现克隆环的密封，然后用胰酶消化，以获取单克隆。其中无菌硅脂可以用甘油替代，甘油可以正常的高温高压灭菌。另外，建议使用结晶胰蛋白酶，可以在消化细胞时减少对细胞的伤害。
本产品高度10mm，内径5mm，外径7mm，壁厚1mm。
产品使用：（仅供参考）
1. 使用倒置显微镜或体视解剖显微镜观察存有可分离克隆的培养皿，调节光照强度与角度，清晰分辨并筛选存活细胞克隆。
2. 筛选理想克隆后，用记号笔在培养皿底部对应位置圈出克隆区域。优先挑选大小均一的克隆；体积过大的克隆不宜选用，其大多起源于多细胞团而非单个细胞，同时选择边界清晰、易于分离的克隆。
3. 弃去原有培养液，使用无钙镁磷酸盐缓冲液（CMF-PBS）清洗培养皿 2 次，吸走悬浮游离的杂细胞。
4. 取无菌镊子夹持灭菌克隆环，将克隆环底部轻蘸无菌硅脂后快速垂直提起；操作规范时硅脂会均匀薄敷于环底。平稳将克隆环套在目标克隆上方，用镊子均匀适度按压密封；压力不均会造成环底密封不严、后续胰酶漏出。全程禁止横向滑移克隆环，防止硅脂覆盖细胞克隆，否则胰酶无法接触细胞，消化失效。
5. 显微镜复核克隆环位置：确保环体完全包裹目标克隆，密闭区域内无其他杂克隆、零散细胞团。
6. 向克隆环密闭空间内加入 0.2 mL 0.25% 胰蛋白酶溶液。
7. 将培养皿置于 37℃培养箱孵育 5 min；每 2–3 分钟镜检一次，直至细胞收缩变圆、开始脱离皿底。滴加 1–2 滴完全培养液中和胰酶，用巴氏吸管或移液枪轻柔吹打收集细胞悬液。
8. 将收集的细胞悬液转移至适配培养容器，补加足量完全培养液。细胞量充足的大克隆可选用 T-25 培养瓶或 6 孔板；偏小克隆选用 12 孔板，微小克隆选用 24 孔板。细胞悬液稀释度过高会导致增殖迟缓甚至停滞；第一次吸取细胞后，必须用培养基多次润洗克隆环，回收残留细胞一并转移培养，提高克隆存活率。
9. 放入培养箱常规培养，后续观察细胞贴壁与增殖状态。
本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！
公司名称：上海诺宁生物科技有限公司
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