6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯
6-FAM SE (6-Carboxyfluorescein succinimidyl ester)
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
NBS5818-25g | 6-FAM SE 6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯 | 25g |
NBS5818-50g | 6-FAM SE 6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯 | 50g |
NBS5818-100g | 6-FAM SE 6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯 | 100g |
产品简介:
6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(6-Carboxyfluorescein succinimidyl ester, 6-FAM SE)是5/6-FAM SE(FITC-NHS)的单一纯化异构体,是6-FAM的胺反应性琥珀酰亚胺酯。是最受欢迎的绿色荧光染料之一,用于核苷酸和核酸的标记。与5-FAM相比,6-FAM更少用于制备小分子标记物。
产品特性:
1) CAS NO.:92557-81-8
3) 同义名:6-FAM, SE; 6-FAM,NHS ester; 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester; 6-Carboxyfluorescein NHS ester; 6-Carboxyfluorescein, succinimidyl ester; 6-羧基荧光素N -羟基琥珀酰亚胺酯;6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯;
3) 分子式:C25H15NO9
4) 分子量:473.39
5) 荧光:λex 492 nm; λem 517 nm in DMF
6) 外观:粉末
7) 溶解性:溶于DMSO、DMF
8) 纯度:≥95%
保存条件:
-20℃避光干燥保存,2年有效。
注意事项:
1. 6-FAM SE对湿度敏感。为了避免产品受潮,务必在开盖前将低温保存的产品从冰箱取出,平衡至室温至少30min再使用。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
SE化合物生物标记的几个考虑因素:
1) 溶剂
大多数情况下,SE化合物(反应性染料)都是疏水性分子,需用无水DMF或DMSO作为溶剂。比如:6-FAM SE(Mw:473.39)需先溶于高质量无水DMSO配制成≥1mg/ml的母液,之后加入反应缓冲液中进行标记实验。强烈推荐新鲜配制母液和工作液,如果非要保存母液的话,请务必根据单次用量分装,≤-20℃避光密封干燥保存,尽量在1个月内用完。
2) 反应pH
SE与胺的标记反应具非常强的pH依赖性。胺反应化合物与非质子化的脂肪胺反应,包括:蛋白的末端胺,赖氨酸的ε-氨基。氨酰化通常在pH 7.5以上进行。通过SE基团的蛋白修饰通常在pH 7.5-8.5之间进行,而异硫氰酸基团需在pH 9.0-10.0之间才能获得最佳的标记效果。
3) 反应缓冲液
缓冲液含游离胺(比如:Tris、甘氨酸和巯基化合物)必须避免,因为这些也是胺反应试剂。铵盐(硫酸铵或醋酸铵)普遍用于蛋白沉淀中,必须在进行染料标记之前去除。
比如:6-FAM SE进行蛋白标记,可选择50mM硼酸钠缓冲液(pH 8.5)作为反应缓冲液。
4) 反应温度
大部分标记反应在室温进行,然而,对于某些特殊的标记反应可能需提高或降低温度。