外泌体红色荧光标记染料(PKH26)
Exosome Red fluorescent labeling dye (PKH26)
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
NW3216 | 外泌体红色荧光标记染料(PKH26) | 20μL(1mM) |
【温馨提示】:见我司整理的专注外泌体研究,外泌体提取专家,专注外泌体提取试剂盒产品专题。
产品简介:
PKH26 外泌体红色荧光标记染料能将带有较长脂质尾巴的黄色-橙色荧光染料(PKH26)结合到细胞膜脂质区域上。该试剂可以在染色过程中增加染色效率,同时维持细胞活力。可用于外泌体的标记染色实验,监测细胞吞噬作用。
产品组成:
组分 | 名称 | 规格 |
A | PKH26 linker(for red fluorescent cell labeling) | 20 μL |
B | Diluent C(for General Membrane Labeling) | 200 μL |
荧光波长:λex 551 nm;λem 567 nm
保存条件:
2-8℃避光(一年有效)
产品使用:
一、外泌体蛋白定量:
取适量外泌体进行 BCA 蛋白浓度测定以确定外泌体蛋白量;
二、 染料工作液制备:
用“Diluent C”将“PKH26 linker(for red fluorescent cell labeling)” 储存液稀释 10 倍,配制浓度为 100 μM 的染料工作液(避光操作,工作液应根据实验用量适当配制,现配现用);
三、外泌体染色:
1. 在外泌体中加入染料工作液,建议加入剂量如下:
外泌体蛋白量 | 加入染料工作液剂量 |
10 - 200 μg | 50 μL |
200 - 500 μg | 100 μL |
500 - 1000 μg | 200 μL |
2. 加入染料工作液后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再静置孵育10min;
3. 向孵育后的外泌体-染料复合物中加入10 mL的1×PBS混匀;
4. 按照外泌体提取方法再次提取外泌体以去除多余染料;
5. 取200μL 1×PBS重悬沉淀物,沉淀即为染色后的外泌体。
注意:过度染色会导致外泌体膜完整性丧失,最佳PKH26染料/外泌体用量需根据自身实验而决定。
注意事项:
1. PKH26 母液易水解,建议分装保存,分装后用封口膜密封保存;
2. PKH26 工作液应现配现用,不能提前配制,否则将影响染色效果;
3. PKH26 溶解液在较低温度下会凝固而粘在管底内,可以 37℃水浴片刻至全部融解后使用。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题:
1. 建议用于染料标记的外泌体原始浓度达到 0.5~1 μg/μL。外泌体浓度过低实验失败风险较高。
2. 外泌体染色步骤中去除游离染料的步骤必不可少,以避免游离染料对后期实验的干扰。这一步相当于重新提取外泌体,所有外泌体提取纯化方式都适用。
3. 染料标记外泌体与细胞共孵育的培养条件尽可能使用无血清培养基,以提高细胞对染料标记外泌体的摄取效率,共孵育参考时长为2~24 h。
4. 本染料也可用于细胞膜染色,参考剂量染料浓度为2 μM,细胞浓度为1×107 cells/mL。
5. 由于外泌体染色效率难以达到100%,且在去除游离染料过程中无法避免外泌体的损失,因此,建议制备2倍于共孵育实验所需外泌体量以进行染料标记实验。
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
200 μL(1mM) | ||
20μL(1mM) | ||
20μL(1mM) | ||
25T |