辣根过氧化物酶标记Protein A
HRP conjugate Protein A
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 | 价格 |
NBS7014-1mg | 辣根过氧化物酶标记Protein A (冻干粉) | 1mg | 750 |
NBS7014-1ml | 辣根过氧化物酶标记Protein A (1mg/ml) | 1ml | 800 |
产品简介:
辣根过氧化物酶标记Protein A (Horseradish Peroxidase-labeled Protein A, HRP-labeled Protein A or HRP-Protein A),也称辣根过氧化物酶标记蛋白A、过氧化物酶标记Protein A、Protein A-HRP、Protein A (HRP)或Protein A (HRP Conjugate),可以用于IgG及其标记或结合的抗体、核酸、蛋白等的检测。具体用途包括Western、ELISA、免疫组化等。
本辣根过氧化物酶标记Protein A用高纯度的Recombinant Protein A (>98% by SDS-PAGE and HPLC analysis)和超纯的辣根过氧化物酶(RZ>3)通过化学键偶联而成,确保产生极低的本底和极高的灵敏度。
Protein A是由几种金黄色葡萄球菌产生的细胞壁成分,由单个多肽链组成,几乎不含碳水化合物,Recombinant Protein A是一种基因工程蛋白,在大肠杆菌中产生,其功能与天然Protein A基本相同,它由5个串联排列的IgG结合结构域E-D-A-B-C组成,已去除细胞壁结合区、细胞膜结合区和白蛋白结合区,以确保最大的特异性IgG结合。Protein A可以与各种人、小鼠和大鼠IgG亚类(例如,人IgG1、IgG2、IgG4;小鼠IgG2a、IgG2b、IgG3;大鼠IgG2c)结合,它还与来自兔、豚鼠、猪、狗和猫的总IgG结合,是纯化多克隆或单克隆IgG抗体的理想选择。
辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP),可以在Western、EMSA、Southern或Northern等检测时催化发光底物试剂(如ECL)产生化学发光,可以在ELISA检测时催化TMB产生蓝色,也可以在免疫组化、免疫细胞化学或Western blot检测时催化DAB产生棕色沉淀。
本辣根过氧化物酶标记Protein A以溶液和冻干粉两种形式提供。溶液可直接使用,浓度为1mg/ml;冻干粉可使用纯水、PBS (pH7.4)等溶解后使用,推荐复溶浓度为1mg/ml。本产品浓度为1mg/ml时用于各种常规用途的推荐稀释比例参考下表,实际实验操作过程会受检测方式的灵敏度、抗体与待测蛋白亲和程度、孵育温度和时间等因素影响,需根据具体情况适当调节辣根过氧化物酶标记Protein A的稀释比例。
WB | IHC | ELISA |
1:2500-20,000 | 1:250-2500 | 1:5000-100,000 |
保存条件:
-20ºC避光保存,1年有效。
产品使用:
1. 收到产品后请立即按照说明书推荐的条件保存。对于冻干粉,由于微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或不可见的蛋白层,所以在打开管盖前,建议在离心机中约8,000-12,000×g离心10-30秒,使附着在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底。
2. 冻干粉可使用PBS或超纯水配制成一定浓度。配制后-20ºC至少可保存6个月。
3. 具体的最佳工作浓度请自行参考相关文献,或者根据实验目的,通过实验进行摸索和优化。
注意事项:
1. 收到本产品后请立即使用或按照说明书推荐的条件保存。随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降。由于蛋白的每次冻融均会引起部分失活,所以首次复溶并配制成相应浓度的储存液后,须分装后-20ºC保存,以避免反复冻融。
2. 叠氮钠会抑制辣根过氧化物酶的活性,在含有辣根过氧化物酶的溶液中不可加入叠氮钠。
3. 冻干粉复溶时用移液枪的吸头轻吹几下或者轻轻摇晃,即可完全溶解。
4. 本产品冻干粉含一定的保护剂;1mg/ml溶液装含50%甘油。
5. 请勿用vortex剧烈振荡,以免蛋白变性而失活。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!