甲基纤维素(细胞培养级,粘度:1500mPa.s)
Methylcellulose (Suitable for Cell Culture, Viscosity: 1500 mPa·s)
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 | 价格 |
NBS0532-100g | 甲基纤维素(细胞培养级,粘度:1500mPa.s) | 100g | 1200 |
NBS0532-250g | 甲基纤维素(细胞培养级,粘度:1500mPa.s) | 250g | 2100 |
NBS0532-500g | 甲基纤维素(细胞培养级,粘度:1500mPa.s) | 500g | 3450 |
产品简介:
甲基纤维素是由纤维素经醚化反应制得的两亲性高分子聚合物,兼具亲水性与疏水性基团,保留了纤维素原有的优良理化特性。
本产品为低内毒素细胞培养级别,作为细胞培养凝胶支持集落形成细胞的生长与分化,广泛应用于造血祖细胞集落形成单位(如CFU-G、CFU-GM)的培养及药物毒性检测等实验。其稳定的凝胶特性有助于模拟体内微环境,促进细胞三维生长,提高实验结果的可重复性与可靠性。
保存条件:
室温保存(三年有效)。
产品特性:
1) 中文名称:甲基纤维素
2) 英文名:Methylcellulose
3) 性状:白色粉末
4) CAS No.: 9004-67-5
5) 粘度:1500mPa.s
产品使用(CFU(集落形成单位)实验):
1. 培养基配制
a) 取适量甲基纤维素粉末(通常终浓度1.0–1.5% w/v),加入基础培养基(如IMDM或RPMI-1640),室温搅拌30分钟使其充分水合。
b) 高压灭菌(121°C,15分钟)或过滤除菌(甲基纤维素溶液粘度较高,过滤困难,通常采用高压灭菌)。
c) 冷却至37°C后,根据实验需求,添加生长因子(如SCF、IL-3、IL-6、GM-CSF、EPO等)、胎牛血清(FBS,终浓度10–20%)及抗生素。
2. 细胞准备
a) 分离骨髓细胞、外周血单个核细胞或脐带血细胞。
b) 计数活细胞(台盼蓝排除法),调整浓度至1×105–2×105 cells/ml。
3. 接种培养
a) 将细胞悬液与甲基纤维素半固体培养基按1:10比例混合,充分混匀后,用注射器或专用分液器将1.1 ml混合液接种于35 mm培养皿或6孔板。
b) 轻轻旋转培养皿使培养基均匀分布,避免气泡。
4. 培养条件
37°C、5% CO2、饱和湿度培养箱中培养10-14天,期间避免移动或震动,防止集落扩散融合。
5. 集落计数与鉴定
培养结束后,倒置显微镜下观察计数,根据形态区分不同集落类型:
a) CFU-G:粒细胞集落
b) CFU-M:巨噬细胞集落
c) CFU-GM:粒-巨噬细胞混合集落
d) BFU-E:爆式红系集落
e) CFU-E:红系集落
f) CFU-GEMM:多系混合集落
6. 结果分析
记录各类型集落数量,计算集落形成效率(CFE):
CFE =(集落数/接种细胞数)×100%
注意事项:
1. 本品能溶于冷水,形成透明的粘稠溶液,不溶于热水;
2. 当加热到一定温度时甲基纤维素水溶液因凝胶或生成沉淀而成为不透明溶液。但是它在逐渐冷却后又较变成原来的溶液状态;
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!