0.25%胰酶(含0.02% EDTA,含酚红)
0.25% Trypsin (with 0.02% EDTA and Phenol Red)
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 | 价格 |
NBS4510-100ml | 0.25%胰酶(含0.02% EDTA,含酚红) | 100ml | 156 |
NBS4510-500ml | 0.25%胰酶(含0.02% EDTA,含酚红) | 500ml | 408 |
产品简介:
胰蛋白酶(Trypsin)是细胞培养中最经典的动物源性丝氨酸肽链内切酶,能特异性识别并切割蛋白质多肽链中赖氨酸和精氨酸残基的羧基端肽键。在贴壁细胞传代过程中,胰蛋白酶通过水解细胞间及细胞与基质间的关键蛋白(如纤连蛋白、层粘连蛋白),高效破坏细胞连接,实现单细胞化,是连续细胞培养不可或缺的工具。
EDTA(乙二胺四乙酸)作为钙镁离子螯合剂,可协同增强胰蛋白酶活性:一方面削弱细胞间黏附分子依赖的钙离子桥接作用,另一方面抑制胰蛋白酶自溶降解。两者联用能显著缩短消化时间(通常2-5分钟),提高细胞存活率(>95%),并减少胰酶用量,降低对细胞表面抗原的损伤。
本试剂采用无动物源成分胰蛋白酶配制,内毒素水平<0.5EU/ml,经0.22μm过滤除菌,可直接用于原代细胞、干细胞及工程细胞系的消化传代,支持免疫细胞、肿瘤细胞、上皮细胞等多种贴壁细胞类型,为细胞治疗、抗体生产及组织工程提供安全、高效、温和的消化解决方案。
保存条件:
-20℃保存(一年有效)
产品使用:
以T25培养瓶为例:
1. 细胞洗涤:传代前吸除培养瓶内旧培养基,沿侧壁缓慢加入3ml无菌PBS或DPBS,轻轻晃动冲洗细胞单层以去除残留血清及死细胞,吸净洗涤液。此步骤可显著降低血清对胰酶活性的抑制。
2. 消化与中和:加入1ml胰酶,水平摇晃使其均匀覆盖细胞层,置于37℃培养箱孵育3–5分钟。显微镜下观察,待细胞变圆、间隙增大时,立即用3ml完全培养基(含血清)终止消化并轻柔吹打使细胞脱落。将细胞悬液转移至离心管,300–400×g离心3分钟,弃上清。
3. 重悬与传代:用适量新鲜完全培养基重悬细胞沉淀,根据实验需求调整细胞密度,按适当比例接种至新培养瓶继续培养。
注意事项:
1. 消化时间需根据细胞类型优化,避免过度消化影响细胞活性;全程严格无菌操作。
2. 开封后需转移至4℃保存,注意避光,并请于1周内使用完毕。为避免活性成分降解,不建议反复冻融。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!