细胞同步化试剂盒

Cell Syncornization Kit 

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【产品介绍】 

 细胞同步化培养技术是利用药物终止DNA合成，使细胞周期停止在S期。在细胞培养过程中加入 Solution-A ，抑制大部分细胞分裂滞留在S期，经过 16 - 18 小时后，再额外添加Solution-B，就能使细胞集体跨越Solution-A造成的停滞，从而同步进入细胞分裂期，达到细胞周期同步化的目的。随后再经过低渗、固定及染色处理后，细胞中可见明显的染色体条带，可在显微镜下观察并评估染色体是否异常。 高分辨率分析法是常用的一种细胞核型分析操作过程，能产生大量处于有丝分裂前期至中后期状态的细胞，此时细胞中的姐妹染色体凝聚度较松散且形态较长，经过G显带处理后，能看到比一般正常实验方法处理的细胞更明显的G显带条纹，因此高分辨率分析法能得到更详细的细胞核型分析结果。 

 试剂盒内含有的试剂: 

 1. Solution-A，氨甲蝶呤（MTX）： 10^-5 M，1.5 mL /管，4管。 

 2. Solution-B，胸苷（Thymidine）： 10^-3 M，1.5 mL /管，4管。 

 【使用方法】 

 以外周血淋巴细胞核型分析为例 

 1. 用肝素预处理全血样品后，取0.5 mL 全血加入 至含5 mL外周血细胞培养基中。 

 2. 培养48小时后，小心摇晃样品管并同时加入50 uL 试剂盒10^-5 M Solution-A（最终浓度为：10^-7 M）。 

 3. 加入Solution-A 培养大约 17 小时后，轻微震荡 混匀样品管并同时加入50 μL Solution-B（最终浓 度为：10^-5 M）， 再次混匀。 

 4. 接着再培养5- 5.5小时后，加入适量体积的秋 水酰胺溶液（VivaCell货号：C3541），以终浓 度为准（推荐终浓度为0.1ug/ml），孵育30-50 min。

     秋水酰胺作用时间会影响染色体长度，时间越长，染色体越短。 

 5. 将培养物转移到离心管中，并以500 xg离心5 min。 

 6. 去除上清液并在离心管中重新悬浮细胞，加入 5-10 ml 提前预温到37°C的0.075 M氯化钾低 渗溶液（VivaCell货号：C3540），在37°C下培 养30 min。 

 7. 以500 xg离心5 min。 

 8. 去除上清液，搅动细胞沉淀物，并逐滴加入5 -10 ml 由乙酸：甲醇=1:3组成的新鲜冰冷固定 剂。在4℃下放置10分钟。 

 9. 重复步骤7和8。 

10. 将细胞沉淀重新悬浮在少量0.5-1 ml新鲜固定 剂中，滴在干净的载玻片上，让其风干。 

11. 在这个阶段，用吉姆萨（VivaCell货号： C3720）染色处理后做染色体核型分析。 

 【储存条件及保质期】 

 本试剂盒应在- 10°C~ - 20°C 储存，请避光保存，并在产品有效期内使用。 有效期为18个月。蓝冰运输。 

 【注意事项】 

 氨甲蝶呤可能对生殖功能或胎儿造成不良影响，可能引起眼睛、皮肤和呼吸道的刺激，可能引起血液异常和导 致遗传性疾病。请避免直接接触，使用过程做好防护措施， 如与皮肤或黏膜接觸， 请用大量自来水冲洗并视情况就医冶疗。 

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仅用于科研使用，不能用于临床诊断。