HAT培养基补充物 (50×) 

产品简介：

单克隆抗体的生产涉及将骨髓瘤细胞与脾细胞融合，并在含有次黄嘌呤-氨甲蝶呤-胸苷（HAT）补充培养基中选择杂交瘤（细胞杂交体）。氨甲蝶呤通过抑制二氢叶酸还原酶阻断DNA的合成。缺乏利用核苷酸补救途径能力的细胞会被淘汰。具有次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HPRTase）和胸苷激酶（TK）酶的细胞，在提供次黄嘌呤和胸苷的情况下可以利用补救途径。

这种培养基的目的在于：（1）选择性地杀死那些适应组织培养、否则会胜过任何产生的杂交瘤的未融合骨髓瘤细胞；（2）消除缺乏HPRT酶的骨髓瘤-骨髓瘤杂交瘤。HPRT酶阳性的脾脏-脾脏杂交瘤虽然对氨甲蝶呤不敏感，但在培养中通常寿命较短。

在选择完成后（大约10-14周），通过在含有次黄嘌呤-胸苷（HT）的培养基中多次传代（大约2-3周）将氨甲蝶呤从培养物中稀释，然后再转移到正常杂交瘤生长培养基中。

属性：

别名：HAT Supplement, Hypoxanthine-Aminopterin-Thymidin (HAT) media supplement

无菌性：γ射线照射

技术：适用细胞培养，杂交瘤

杂质：内毒素，已测试

储存温度：−20°C

应用：

1. 次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶 (HPRT) 缺陷型克隆体的选择和验证；

2. mAbs（单克隆抗体）制备；

3. 基于荧光素酶的生物测定 （LUC）。

制备说明：

用10 ml无菌细胞培养基重悬小瓶的内容物。 储备溶液足以制备500 ml培养基。 最终工作浓度：100 μM氨基喋呤，0.4 μM氨基喋呤，16 μM胸苷。

注意事项：

1.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！