HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus
产品线 | 产品目录名称 | 规格 | 货号 | 目录价 |
分子生物学 | HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus | 5*1 mL | BR0015-01 | 350 |
产品介绍
本产品是一款使用SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行qPCR反应的专用预混液。核心组分Hot-start Taq是基于抗体法修饰,搭配针对qPCR 系统优化的最适Buffer,显著提高了扩增特异性和低拷贝基因的检测灵敏度,能够在宽广的定量范围内得到优异的扩增线型,对靶基因进行 准确定量、检测,重复性好,可信度高。本产品中含有ROX Reference Dye,适用于大部分qPCR仪器。本产品是一款2 × 预混液,只需额外加 入引物、模板即可,使用方便。
注意事项
1 使用前,请上下颠倒轻轻均匀混合,避免起泡,并经轻微离心后使用。试剂没有混匀,其反应性能会有所下降,不能用振荡器混匀。
2 融解后的试剂请于冰上放置。
3 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。
运输与保存方法
冰袋( wet ice)运输。收到产品后放到-20℃避光保存。
实验流程
配置如下PCR反应体系
成分 | 体积 |
2 × HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus | 10 μL |
Primer F (10 μM) | 0.4 μL |
Primer R (10 μM) | 0.4 μL |
Template DNA | X μL |
ddH₂O | Up to 20 μL |
表1. HS Universal qPCR Master Mix,ROX plus 反应体系
建议PCR程序
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95°C | 30 sec–3 min | 1 Cycle |
循环反应 | 95°C | 10 sec | 40 Cycles |
55–60°C | 10–30 sec | ||
融解曲线 | 95°C | 15 sec | 1 Cycle |
60°C | 60 sec | ||
95°C | 15 sec |
表2. HS Universal qPCR Master Mix,ROX plus 反应程序
95℃ 30 sec 该预变性条件适合大多数扩增反应,如模板结构复杂,GC含量高,可将预变性时间延长至3min,以提高预变性效果,同时酶活可以更高程度释放,得到更好的实验结果。