Hoechst 33342 活细胞细胞核荧光探针

Hoechst 33342, Live-Cell Nuclear Probe
 

温馨提示：可查阅我司细胞核（Cell Nuclear）荧光探针产品专题了解更多信息。

产品简介：

Hoechst 33342，又称双苯并咪唑 H 33342（Bisbenzimide H 33342），是一类 A-T 偏好型 DNA 小沟结合配体，具备良好细胞膜通透性，为细胞核 DNA 检测常用荧光染料。该染料结合 DNA 后可产生明亮的蓝色荧光，最大激发波长约 350 nm，最大发射波长约 461 nm。

相较于其他 Hoechst 系列染料，Hoechst 33342 结构上多一个乙基，亲脂性更强；该特性使其膜穿透能力显著提升，是活细胞染色的优选染料，有研究表明它可替代多种经典 DNA 嵌入染料。Hoechst 33342 为非嵌入型染料，特异性结合于 DNA 富含 A-T 碱基序列的小沟区域，这种独特作用模式可实现精准、稳定的 DNA 染色；且与 DNA 结合时细胞毒性低，可较好维持细胞活性。

Hoechst 33342 应用场景丰富：可配合流式细胞分选（FACS）开展基于 DNA 含量的活细胞分选、监测活细胞染色质分布、检测 BrdU 掺入；也可用于荧光显微镜下固定细胞观测，以及细胞周期、早期凋亡相关研究。除荧光标记用途外，Hoechst 33342 还具有多种细胞生物学效应，可用于细胞类型区分；能够诱导细胞分化、可逆结合弗兰德红白血病细胞、抑制拓扑异构酶 I（Topo I）活性、诱导 HL-60 细胞凋亡，同时调控连接肌质网细胞的 Ca²⁺外流并参与细胞分化调控。

本品为粉末剂型，可根据实验需求自行配制至目标工作浓度。如需即用型染色液，可选购即用型 Hoechst 33342 染色液（货号NBS8033）。

化学信息: 

1)     CAS NO.：23491-52-3

2)     英文同义名：2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride; bisBenzimide H 33342 trihydrochloride; HOE 33342; Hoechst 33342 bisBenzimide;

3)     中文同义名：2'-(4 - 乙氧基苯基)-5-(4 - 甲基 - 1 - 哌嗪基)-2,5'- 二 - 1H - 苯并咪唑三盐酸盐；双苯酰亚胺H 33342三盐酸盐；Hoechst 33342双苯酰亚胺；

4)     分子式：C₂₇H₂₈N₆O · 3HCl · xH₂O

5)     分子量：561.93 (无水基准，anhydrous basis)

6)     纯度：≥95%

7)     外观：黄绿色粉末

8)     Ex/Em：346/460 nm（游离染料）；350/461 nm（与 DNA 结合后）

9)     结构式：

保存条件: 

-20℃避光保存（一年有效）

产品使用：

1.     储备液配制：

以 DMSO 配制 1 mg/mL Hoechst 储备液；配制完成后避光、-20 ℃分装保存，避免反复冻融，有效期 12 个月。

2.     工作液配制：

临用前，取适量 Hoechst 33342 储备液，以生理盐水或 PBS 稀释至目标工作浓度（0.5–10 μg/mL）。

注：请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度，且现用现配。

3.     固定细胞 / 组织染色：

固定后的细胞或组织样品，经洗涤充分去除固定剂后再染色。Hoechst 33342 一般放在多重染色流程的最后一步；若无其他染色需求，可直接进行本染料染色。

1)     贴壁细胞、组织切片：加入足量 Hoechst 33342 染色液，完全覆盖样品。

悬浮细胞：加入不低于样品体积 3 倍的染色液，充分混匀，室温孵育 3–5 min。

2)     吸去染色液，采用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2–3 次，每次 3–5 min。

3)     可直接镜检，或封片后置于荧光显微镜观察。激发 / 发射波长：Ex/Em = 350/461 nm。

4.     活细胞 / 活组织染色：

1)     向细胞培养体系中加入 Hoechst 33342 染色液，添加体积约为培养基体积的 1/10，确保样品被完全覆盖。参考用量：6 孔板每孔约 1 mL；96 孔板每孔约 100 μL。

2)     37 ℃孵育 10–20 min。

3)     PBS 或适宜缓冲液洗涤细胞 2 次。

4)     可直接镜检，或封片后置于荧光显微镜观察。激发 / 发射波长：Ex/Em = 350/461 nm。

注意事项：

1.     Hoechst 33342 具有一定刺激性，操作时请做好防护。

2.     荧光染料易发生光淬灭，建议染色后当日完成检测。可使用抗荧光淬灭封片剂（货号NBS0032），延缓荧光淬灭。

3.     为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！