<BK0061/BK0062/BK0063/BK0064> ACE 一步法PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

栏目：蛋白预制胶

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本产品适用于 Tris- Glycine电泳体系，包含制备浓缩胶（上层胶）和分离胶（下层胶）的预混溶液，配胶过程无需计算各组分的用量、无需稀释、无需添加 TEMED，只需将上层胶溶液与上层胶缓冲液、下层胶溶液与下层胶缓冲液分别 1：1混合，加入促凝剂即可凝胶，简化制备 SDS-PAGE凝胶的操作步骤，可快速灌制多块凝胶，使制胶过程更加便捷。上层胶带有颜色使上样孔清晰可见，便于上样。本产品配套提供的促凝剂干粉状态保存于 2-8℃，溶解后应保存于-20℃。

一步法PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

产品线	产品目录名称	规格	货号	目录价
蛋白电泳	8% 一步法PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒	250ml	BK0061-01	300
	10% 一步法PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒	250ml	BK0062-01	300
	12% 一步法PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒	250ml	BK0063-01	300
	15% 一步法PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒	250ml	BK0064-01	300

产品介绍

产品特点：

1）一步法灌制胶 —依次灌制下层胶和上层胶即可完成制胶；

2）操作简单快速 —制胶无需计算各组分用量和准备额外试剂，且凝胶快速；

3）上层胶为彩色 —彩色的上层胶，便于上样；

4）避免恶臭气味 —无需添加 TEMED，免除臭味扩散。

保存条件

产品可在 2~8℃条件下保存一年。

产品组分

组分名称	体积	储存温度
下层胶溶液（胶液 A）	250 mL	2–8°C
下层胶缓冲液（缓冲液 A）	250 mL	2–8°C
上层胶溶液（胶液 B）	100 mL	2–8°C
上层胶缓冲液（缓冲液 B）	100 mL	2–8°C
促凝剂	8 mL × 2	干粉：2–8°C；溶解后：-20°C

注意：

① 向装有促凝剂干粉的瓶子中加入 8 ml的 ddH₂O，摇晃溶解，溶解后的促凝剂，建议分装保存于-20℃；每次使用前需完全融化后，再使用。

② 为保证试剂盒的长时间使用，本试剂盒额外配备一瓶促凝剂干粉，两瓶促凝剂干粉的使用方法一致。

③ 建议一瓶促凝剂干粉使用完之后，再溶解另一瓶。

使用说明

将制胶玻璃板（务必检查是否对应正确，例如灌注的是 1.0 mm的胶，那么一定要用对应的 1.0 mm的玻璃板）清洗干净，装配好，以制备一块 mini胶为例（建议先制备下层胶，等下层胶凝固好，再制备上层胶混合液，然后进行上层胶的灌注）：

1 下层胶的制备：

按照“下层胶配制建议（单片胶）”表格中的用量，根据需要配制的凝胶厚度，分别进行下层胶各个组分的取液。

① 取等体积的胶液 A和缓冲液 A，加入到容器中，轻轻摇晃混匀。

② 在混合溶液中加入促凝剂，轻轻摇晃混匀，避免剧烈震荡出现过多的气泡。

③ 将上述混匀后的溶液灌注到装配好的制胶玻璃板中，根据所用梳齿长度不同，灌注的液面应在插入的梳齿顶端以下 0.5cm为宜（为避免损耗，此步骤配制的溶液为过量，请勿全部注入）。

④ 建议用 ddH₂O对灌注的下层胶进行封闭（封闭可获得更加平整的上下层胶分界线，可以获得更好的跑胶效果）。在下层胶灌注到玻璃板之后，立即在下层胶液面上缓缓注入 ddH₂O，直至与玻璃胶板短板上沿齐平。

⑤ 等待下层胶凝固后（约为 10 min）倒去上方 ddH₂O，再进行上层胶的制备。

2 上层胶的制备：

按照“上层胶配制建议（单片胶）”表格中的用量，根据需要配制的凝胶厚度，分别进行上层胶各个组分的取液。

① 取等体积的胶液 B和缓冲液 B，加入到容器中，轻轻摇晃混匀。

② 在混合溶液中加入促凝剂，轻轻摇晃混匀，避免剧烈震荡出现过多的气泡。

③ 将上述混匀后的溶液轻缓灌注到制胶玻璃板中，直至与玻璃胶板短板上沿齐平，插入对应的梳子（务必检查使用的梳子是否正确，例如灌注的是 1.0mm的胶，那么一定要用对应的 1.0 mm梳子）。

④ 等待上层胶凝固后（约为 10 min），即可轻轻拔出梳子进行电泳。

下层胶配制建议（单片胶）

凝胶厚度	下层胶溶液（胶液 A）	下层胶缓冲液（缓冲液 A）	促凝剂（APS）
0.75 mm	2.0 mL	2.0 mL	40 μL
1.00 mm	2.7 mL	2.7 mL	60 μL
1.50 mm	4.0 mL	4.0 mL	80 μL

上层胶配制建议（单片胶）

凝胶厚度	上层胶溶液（胶液 B）	上层胶缓冲液（缓冲液 B）	促凝剂（APS）
0.75 mm	0.50 mL	0.50 mL	10 μL
1.00 mm	0.75 mL	0.75 mL	15 μL
1.50 mm	1.00 mL	1.00 mL	20 μL

备注：

① 在下层胶灌注后，如果选择不封闭，那么无需等待下层胶凝固，可以直接进行上层胶的灌注（但是由于此时下层胶尚未凝固，所以在灌注上层胶时，一定要保证操作轻缓，避免将上层胶混合溶液冲入到下层胶混合溶液中，造成灌注的凝胶不均匀）。灌注后，插上对应的梳子，室温静置，等待上/下层胶凝固（约为 10min）后，即可轻轻拔出梳子进行电泳。

② 温度与凝固的速度有显著的正相关性。在相同条件下，随着温度升高，凝固速度加快。实际操作中可根据气温适当调整促凝剂的用量，以达到合适的凝固效果。不同气温条件下促凝剂的使用量建议可以参考下表：

不同气温下层胶促凝剂使用量建议（单片胶）

凝胶厚度	T < 10°C	10°C ≤ T < 20°C	20°C ≤ T < 25°C	T ≥ 25°C
0.75 mm	60 μL	48 μL	40 μL	24 μL
1.00 mm	90 μL	72 μL	60 μL	36 μL
1.50 mm	120 μL	96 μL	80 μL	48 μL

不同气温上层胶促凝剂使用量建议（单片胶）

凝胶厚度	T < 10°C	10°C ≤ T < 20°C	20°C ≤ T < 25°C	T ≥ 25°C
0.75 mm	15 μL	12 μL	10 μL	6 μL
1.00 mm	22.5 μL	18 μL	15 μL	9 μL
1.50 mm	30 μL	24 μL	20 μL	12 μL